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（5）胚胎工程
——高二生物学苏教版（2019）选择性必修三期末易错题集训
【易错点分析】
一、受精过程相关概念
精子获能：精子获能是指精子获得受精 “能力”，而不是获得能量
排卵：排卵是指卵子从卵泡中排出，而不是卵泡从卵巢中排出。不同动物排出的卵子成熟程度不同，有的是初级卵母细胞，如马、犬等；有的是次级卵母细胞，如猪、羊等，但都要在输卵管内进一步成熟，到 MⅡ 期时才具备与精子受精的能力
卵子减数分裂 Ⅱ：卵子减数分裂 Ⅱ 是在精子和卵子结合的过程中完成的，减数分裂 Ⅱ、受精作用和受精卵的早期细胞分裂都是在雌性动物的输卵管中进行的。
二、胚胎早期发育
细胞变化：细胞卵裂过程中，单个细胞体积减小，但核物质（DNA）不变，因此核质比增大，而不是减小
细胞分化：高等哺乳动物细胞分化开始于囊胚期，终止于生命结束。囊胚期的内细胞团细胞属于全能细胞，滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘。进行胚胎分割时，应选择囊胚期的内细胞团进行均等分割
三、体外受精
卵母细胞采集：对于大型动物可从卵巢内获取卵母细胞，但需要在体外培养到减数分裂 Ⅱ 中期才能参与受精，而不是直接获取成熟卵子
精子处理：体外受精时，精子需要进行获能处理，常用的方法有培养法和化学诱导法。如果没有对精子进行正确的获能处理，受精过程可能无法正常进行
四、胚胎移植
胚胎来源：胚胎可以来自体外受精、核移植等技术，也可以是体内受精后冲取的早期胚胎。但不同来源的胚胎在移植前的处理和培养条件可能有所不同
受体选择：受体母畜必须处于与供体母畜同期发情的状态，这样才能保证受体子宫与胚胎具有相同的生理环境，提高胚胎着床的成功率
五、胚胎分割
分割时期：一般选择发育良好、形态正常的桑葚胚或囊胚进行胚胎分割。如果分割时期不当，可能会影响胚胎的发育潜力
分割技术：分割时要注意将内细胞团均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育
六、干细胞培养
干细胞类型：胚胎干细胞具有发育的全能性，而诱导多能干细胞（iPS 细胞）是通过诱导成体细胞重编程得到的，其全能性与胚胎干细胞有所不同
培养条件：干细胞培养需要特定的培养基和培养环境，如添加一些生长因子、保持合适的温度、湿度和气体环境等。如果培养条件不合适，可能导致干细胞分化或死亡
【易错点练习】
1.下列有关胚胎发育的叙述，错误的是( )
A.受精过程的结束即胚胎发育的开始
B.胚胎发育的初期是在输卵管中进行的
C.桑葚胚期的胚胎从透明带中伸展出来，称为孵化
D.高等动物早期胚胎发育的顺序是受精卵→桑葚胚→囊胚→原肠胚
2.原肠运动是指囊胚细胞有规则地移动，使未来的内胚层和中胚层细胞迁入胚胎内部，而未来的外胚层细胞铺展在胚胎的表面，从而形成原肠胚。原肠胚是早期胚胎发育比较特殊的阶段，细胞会从几百个增加到几千、几万个。下列有关说法正确的是( )
A.卵裂期胚胎中细胞平均体积不断减小，有机物总量不断增多
B.原肠胚开始出现细胞分化并形成两个胚层
C.哺乳动物受精卵一般发育至原肠胚时进入子宫继续发育
D.如果早期胚胎不能正常孵化，胚胎就无法继续发育
3.胚胎工程技术与人们的生活有着越来越密切的关系。下列各项技术中，不属于胚胎工程主要技术的是( )
A.体外受精技术 B.胚胎移植技术 C.胚胎分割技术 D.器官移植技术
4.小鼠体细胞克隆胚胎着床后胎盘发育显著异常可能是与克隆胚胎中H3K27me3印记基因过度表达有关，H3K27me3印记基因敲除极大提高了体细胞克隆的成功率。科学家分别测量H3K27me3印记基因敲除的克隆小鼠（甲组）、H3K27me3印记基因不敲除的克隆小鼠（乙组）和受精卵来源的小鼠（丙组）的体重和胎盘直径，结果如下图所示。下列相关分析错误的是( )
A.克隆胚胎过大可能是克隆胚胎着床后成活率低的原因
B.克隆胚胎过大的原因可能是克隆胚胎的胎盘过大
C.H3K27me3印记基因过度表达抑制胎盘的发育
D.H3K27me3印记基因的表达产物可能影响早期胚胎滋养层细胞的发育
5.下列关于胚胎工程的相关叙述，正确的是( )
A.体外受精前一定要对精子进行获能处理
B.使用肝素溶液促进优良供体母牛超数排卵
C.胚胎移植前需检查胚胎质量并在囊胚或原肠胚时期进行移植
D.胚胎移植前可取少量内细胞团细胞进行性别鉴定和遗传病筛选
6.卵母细胞成熟包括“细胞核成熟”和“细胞质成熟”两个方面。研究人员利用基因敲除技术敲除小鼠的Btg4基因，发现Btg4敲除的卵母细胞虽能正常成熟和受精，但形成的早期胚胎却全部阻滞在1到2细胞阶段，造成雌性不育。胚胎停止发育原因是卵母细胞中的mRNA不能被及时降解。下列说法错误的是( )
A.卵细胞形成过程中减数分裂是不连续的，MⅡ期卵母细胞具备受精能力
B.该实验的目的是探究Btg4基因在卵母细胞和早期胚胎中的作用
C.卵母细胞中mRNA的及时降解是启动早期胚胎基因组激活的前提条件
D.Btg4基因与卵母细胞中mRNA降解有关，可促使卵母细胞的细胞核成熟
7.基因敲除是指利用相应技术手段使特定基因丧失功能。制备基因敲除小鼠需要将编辑过的敲除基因转入小鼠胚胎干细胞，移植至正常小鼠的早期胚胎中，再植入代孕母鼠子宫。出生的F1小鼠发育成熟后互相交配，鉴定F2代小鼠的基因型，筛选得到纯合的基因敲除小鼠。下列相关说法正确的是( )
A.实验中F1代小鼠体细胞中均含有敲除基因
B.进行胚胎移植前，要对受体进行免疫检查，以防止发生免疫排斥反应
C.可选取桑葚胚或囊胚时期的胚胎进行有效分割以获得更多子代个体
D.利用细胞工程和胚胎工程的相关技术即可制备基因敲除小鼠
8.通过试管动物技术可以实现良种动物的快速繁殖。下列相关叙述错误的是( )
A.采集的卵母细胞和精子要分别在体外进行成熟培养和获能处理
B.体外受精时需要人工操作阻止多精入卵
C.胚胎移植时供、受体的生理状态要相同
D.可通过胚胎分割技术提高胚胎的利用率
9.原肠胚形成期被称为人体胚胎发育的“黑匣子”时期。研究人员利用胚胎干细胞，在实验室中制造出不能发育成完整胚胎的“拟原肠胚”模型，用来揭示人类早期胚胎发育的过程。下列说法错误的是( )
A.滋养层细胞将来能发育成胎膜和胎盘
B.利用核移植所得胚胎干细胞，可以诱导发育成适合移植的器官
C.对原肠胚进行胚胎分割，可以提高移植胚胎的利用率
D.该模型可以研究酒精、药物和病原体对胚胎发育的影响
10.单峰骆驼在野外几乎灭绝，科学家欲通过胚胎工程的方法拯救野化单峰骆驼，进行了如图所示研究。请据图分析，下列说法正确的是( )
A.为使A野化单峰骆驼超数排卵，可在其饲料中添加适量的促性腺激素
B.为提高胚胎利用率，可采用体外受精等无性繁殖技术
C.卵裂期，胚胎的总体积不增加，但有机物总量增加
D.若①表示体外受精，可用B野化单峰骆驼的获能的精子与处于MⅡ期卵母细胞完成受精作用
11.如图表示利用黑、白小鼠培养合体幼鼠的流程，下列相关说法错误的是( )
A.所获得的嵌合体幼鼠仍是二倍体 B.可以用荧光标记技术追踪细胞的分化去向
C.孵化是指胚胎从滋养层细胞中伸展出来 D.胚胎细胞的分化方向受到整个个体的调控
12.SRY-PCR胚胎的性别鉴定技术可用于哺乳动物的性别控制，对畜牧繁育有重要意义。先从胚胎中取若干细胞提取DNA进行PCR扩增，用Y染色体上的性别决定基因（SRY基因）制备的特异性探针对扩增产物进行检测,若结果为阳性，则表明胚胎细胞中含SRY基因。
下列叙述错误的是( )
A.①处理的作用是使受体母牛和良种母牛的子宫生理状态相同
B.若②为体内受精,则受精在良种母牛的输卵管中完成
C.若③为体外培养，则需培养到原肠胚期才能分割
D.图中采集到的甲细胞可用于SRY-PCR胚胎性别鉴定
13.近年来发展起来的胚胎工程技术为优良种畜的快速繁殖带来了无限可能。图为经体外受精和胚胎分割移植培育优良奶牛的过程。下列相关说法正确的是( )
A.胚胎分割时需要严格地将内细胞团和滋养层细胞进行均分
B.体外受精之前需要对精子进行获能处理，卵细胞需要完成减数分裂
C.通过胚胎分割获得的两个个体的基因型相同
D.胚胎移植前需要对供体母牛进行同期发情处理
14.线粒体疾病严重危害患者健康。科研人员按如图所示流程进行操作，可以使患线粒体疾病的母亲生育线粒体正常的子代。据图分析，下列叙述错误的是( )
A.甲是MI期产生的第一极体，常以观察到两个极体作为受精的标志
B.丙为重组细胞，受精时透明带反应和卵细胞膜反应可阻止多精入卵
C.丁中的A、B分别为滋养层和内细胞团,A将来发育成胎儿的各种组织
D.丁植入子宫前无需对受体进行免疫检查,因为受体子宫基本不会对胚胎发生免疫排斥反应
15.生物兴趣小组的同学们在对胚胎工程技术进行讨论时发表了以下观点，其中正确的是( )
A.甲同学：通过胚胎分割和胚胎移植技术可实现跨物种的基因交流
B.乙同学：使用显微操作可将桑葚胚中的内细胞团均分，以防止影响胚胎发育
C.丙同学：将不同的三个胚胎移植入同一代孕母体可获得性状不同的三胞胎
D.丁同学：将精子和卵母细胞在体外受精后转移至试管中培养直至获得试管婴儿
16.下图表示研究人员利用胚胎工程培育优质奶牛的过程，下列相关说法正确的是( )
A.①代表体外受精，与体内受精不同的是体外受精获取的精子能立即与卵细胞受精
B.②代表早期胚胎培养，该过程中细胞进行减数分裂，有细胞分化
C.③代表胚胎分割，需均等分割桑葚胚的内细胞团，以免影响胚胎恢复和发育
D.为选育出能泌乳的雌奶牛，移植前需从滋养层部位取样，做染色体分析鉴定性别
17.亚麻酸（LA）能够促进卵母细胞体外成熟和囊胚发育。为了给水牛体外胚胎产业化生产中合理使用亚麻酸提供理论依据，科研人员研究了不同浓度的亚麻酸对水牛卵母细胞体外成熟、早期胚胎发育的影响。分析回答：
①卵母细胞的收集和体外培养：从屠宰场水牛的卵巢中收集并处理卵母细胞，随机分成5组，分别置于不同浓度亚麻酸的培养液中，在5%CO2的培养箱中培养22~24 h。
②卵母细胞成熟判断：在显微镜下观察卵母细胞，其培养到减数分裂Ⅱ中期视为成熟，统计结果如表1。
③体外受精：在受精溶液中进行体外受精后，用显微镜观察判断是否完成受精。
④早期胚胎培养：将受精卵移入胚胎培养液中培养44~48 h后检查分裂情况，每隔48 h更换一次培养液，第5~9天观察囊胚发育情况，统计结果如表2。
表1 亚麻酸对水牛卵母细胞体外成熟的影响
LA浓度（μmol·L-1） 卵母细胞数 核成熟卵子数
0 229 137
10 201 133
50 227 166
100 215 137
200 215 135
表2 亚麻酸对水牛早期胚胎发育的影响
LA浓度（μmol·L-1） 培养卵数 分裂数 囊胚数
0 309 171 75
10 325 182 82
50 292 185 97
100 310 188 84
200 231 145 68
（1）步骤①中，细胞培养箱中加5%CO2的作用是____________________。
（2）步骤②中，成熟卵母细胞内染色体的行为特征是_____________。步骤③中，体外受精过程主要包括__________和受精等主要步骤。
（3）步骤④中，受精卵在经过__________（填一个时期）期后发育成囊胚。
（4）根据实验数据分析，亚麻酸溶液浓度为200 μmol·L-1时，对水牛卵母细胞体外成熟和囊胚发育起__________（填“促进”或“抑制”）作用。
（5）实验结果表明，__________μmol·L-1的亚麻酸对水牛卵母细胞体外成熟和囊胚发育都最有利，判断依据是______________________________。
18.我国中科院的研究团队利用细胞工程和基因编辑技术，成功培育出世界上首例只有双母亲来源的孤雌小鼠和双父亲来源的孤雄小鼠，实现了哺乳动物的同性繁殖。实验流程如图所示，请回答下列问题：
（1）卵细胞转化成phFSC相当于植物组织培养中的____________过程；体外培养动物细胞时，首先应保证其处于____________的环境，除了适宜的营养物质、温度等条件外，还需要控制的气体条件是_____________。
（2）要培育孤雄小鼠需要将精子和具卵细胞细胞核特点的ahESC同时注入去核的卵母细胞形成重构胚，此卵母细胞应体外培养到____________期。在对卵母细胞进行去核时，除了显微操作外还可以采用___________（至少答出两种）等方法处理，得到的重构胚通常需要发育到____________阶段才能进行胚胎移植。
（3）不考虑致死情况，得到的孤雄小鼠性染色体组成为____________。利用胚胎分割的方法对乙进行处理得到了多只孤雄小鼠，在分割囊胚阶段的胚胎时，要注意____________。利用这些孤雄小鼠作为实验材料进行用于医学研究的优点是________________________（从遗传物质角度分析）。
答案以及解析
1.答案：C
解析：AB、卵子和精子在输卵管完成受精后，发育也就开始了，因此胚胎发育的初期是在输卵管中进行的，AB正确；C、早期胚胎发育过程中，囊胚期由于细胞增殖使细胞数量增多，且出现了囊胚腔，因此体积进一步扩大，会从透明带中伸展出来，这一过程称孵化，C错误；D、高等动物早期胚胎发育的顺序是受精卵→桑葚胚→囊胚→原肠胚，D正确。故选C。
2.答案：D
解析：卵裂期的胚胎中，细胞数目不断增加，细胞平均体积不断减小，由于有机物质的不断消耗，有机物总量不断减少，A错误；早期胚胎从囊胚阶段开始出现细胞分化，且原肠胚阶段会形成三个胚层，B错误；哺乳动物受精卵一般发育至桑葚胚或囊胚时进入子宫继续发育，C错误；囊胚进一步扩大会导致透明带破裂，胚胎从其中伸展出来，这一过程叫作孵化，孵化非常重要，如果不能正常孵化，胚胎将无法继续发育，D正确。
3.答案：D
解析：器官移植技术是将一个器官整体或局部从一个个体用手术方式转移到另一个个体的过程，不属于胚胎工程技术。A、B、C三项均属于胚胎工程技术。
4.答案：C
解析：A、与丙组相比，乙组（含有H3K27me3印记基因的克隆小鼠）体重和胎盘直径均高于丙组，乙组体细胞克隆胚胎着床后胎盘发育显著异常，成活率低，推测克隆胚胎过大可能是克隆胚胎着床后成活率低的原因，A正确；B、乙组克隆小鼠的体重、胎盘直径均高于受精卵来源的小鼠（丙），说明克隆胚胎过大的原因可能是克隆胚胎的胎盘过大，B正确；C、甲组为H3K27me3印记基因敲除的克隆小鼠，乙组为H3K27me3印记基因不敲除的克隆小鼠，通过图可以观察到乙组的体重和胎盘直径都高于甲组，说明H3K27me3印记基因过度表达会促进胎盘的发育，C错误；D、滋养层细胞会发育为胎盘和胎膜，H3K27me3印记基因的表达产物可能影响早期胚胎滋养层细胞的发育，进而影响了胎盘的发育，D正确。故选C。
5.答案：A
解析：A、精子需进行获能处理后才具有受精能力，A正确；B、肝素是促进精子获能的有效成分，不能促进优良供体母牛超数排卵，超数排卵应使用促性腺激素，B错误；C、胚胎移植前需检查胚胎质量并在囊胚或桑葚胚时期进行移植，C错误；D、进行性别鉴定和遗传病筛选等应选取胚胎的滋养层细胞，不能取内细胞团，以免影响胚胎的正常发育，D错误。故选A。
6.答案：D
解析：A、卵细胞形成过程中减数分裂是不连续的，MⅡ期卵母细胞具备受精能力，通常将次级卵母细胞培养到MⅡ中期，A正确；B、题意显示，本实验利用基因敲除技术敲除小鼠的Btg4基因后观察其早期胚胎发育情况和育性，故该实验的目的是探究Btg4基因在卵母细胞和早期胚胎中的作用，B正确；C、题意显示“胚胎停止发育原因是卵母细胞中的mRNA不能被及时降解，显然，卵母细胞中mRNA的及时降解是启动早期胚胎基因组激活的前提条件，C正确；D、Btg4基因敲除后卵母细胞能正常成熟和受精，说明该基因与细胞核成熟无关，而形成的早期胚胎却全部阻滞在1到2细胞阶段，推测可能是Btg4基因能促使细胞质成熟，D错误。故选D。
7.答案：C
解析：由分析可知，F1代小鼠是嵌合体小鼠，此代小鼠体细胞有的含有敲除基因，有的体细胞不含有敲除基因，A错误；受体子宫对外来胚胎几乎不发生免疫排斥反应，因此胚胎移植前，不需要对受体进行免疫检查，B错误；胚胎分割借助显微操作技术或徒手操作方法切割桑椹胚或囊胚时期的胚胎成二、四或多等份再移植给受体，从而获得同卵双胎或多胎的生物学新技术，故利用胚胎分割技术可以获得更多的子代个体，C正确；制备基因敲除小鼠需要将编辑过的敲除基因转入小鼠胚胎干细胞，利用基因工程、细胞工程和胚胎工程的相关技术，D错误。
8.答案：B
解析：A、采集的卵母细胞需要在体外进行成熟培养，精子要获能处理，A正确；B、卵细胞可通过透明带反应和卵细胞膜反应阻止多精入卵，体外受精时不需要人工操作阻止多精入卵，B错误；C、对供体和受体同时用激素同期发情处理是为了保证供体和受体具有相同的生理状态，以确保胚胎移植后能正常发育，C正确；D、来自同一个胚胎的后代具有相同的遗传物质，因此利用胚胎分割技术可以获得两个或多个基因型相同的胚胎，可通过胚胎分割技术提高胚胎的利用率，D正确。故选B。
9.答案：C
解析：滋养层细胞将来能发育成胎膜和胎盘，A正确；利用核移植所得胚胎干细胞，可以诱导发育成适合移植的器官，可减少免疫排斥反应，B正确；胚胎分割时应该选择形态正常、发育良好的桑葚胚或囊胚，C错误；“拟原肠胚”模型可以研究酒精、药物和病原体对胚胎发育的影响，D正确。
10.答案：D
解析：A、为使A野化单峰骆驼超数排卵，可注射促性腺激素，促性腺激素化学本质为蛋白质类激素，不能在其饲料中添加，易被蛋白酶消化分解，A错误；B、为提高胚胎利用率，可采用胚胎分割、移植等无性繁殖技术实现，通过胚胎分割获得的胚胎遗传特性相同，体外受精属于有性生殖，B错误：C、卵裂期，胚胎的总体积不增加，但由于细胞呼吸对有机物的消耗，因而有机物总量减少，C错误；D、若①表示体外受精，获能后的精子和MII期卵母细胞才具备受精能力，因此可用B野化单峰骆驼的获能的精子与处于MⅡ期卵母细胞完成受精作用，D正确。故选D。
11.答案：C
解析：A、8细胞胚合并为16细胞胚，并没有进行细胞融合，故所获得的嵌合体幼鼠仍是二倍体，A正确；B、可以用荧光标记技术追踪细胞的分化去向，B正确；C、孵化是指囊胚从滋养层细胞中伸展出来，C错误；D、胚胎细胞的分化方向受到整个个体基因的调控，D正确。故选C。
12.答案：C
解析：过程①为同期发情处理，使受体母牛子宫的生理状态与良种母牛相同，确保胚胎移植后能正常发育，A正确；受精是精子和卵细胞结合形成受精卵的过程，哺乳动物的受精在输卵管中完成，B正确；在进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑葚胚或囊胚进行分割， C错误；图中甲为胚胎的滋养层细胞，用于DNA分析性别鉴定，用SRY基因制备的特异性探针检测的结果若为阴性，表明胚胎细胞中不含SRY基因，说明没有Y染色体，将来发育为雌性动物，反之则发育为雄性动物，D正确。
13.答案：C
解析：A、胚胎分割时需要严格地将内细胞团均分，A错误；B、体外受精之前需要对精子进行获能处理，卵细胞需要处于MⅡ中期；B错误；C、通过胚胎分割获得的两个内细胞团都来源于同一个受精卵的有丝分裂，两个内细胞团的基因相同，故分别发育的两个个体的基因型相同，C正确；D、胚胎移植前需要对受体母牛进行同期发情处理，D错误。故选C。
14.答案：C
解析：由题图可知，甲细胞不含同源染色体，有姐妹染色单体，处于MⅡ期，是MI期产生的第一极体，多数哺乳动物的第一极体不进行减数分裂Ⅱ，常以观察到两个极体作为受精的标志，A正确；丙是供体细胞质和患者极体融合形成的重组细胞，受精时透明带反应和卵细胞膜反应可阻止多精入卵，B正确；囊胚期的内细胞团将来发育成胎儿的各种组织，滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘，A是内细胞团，B是滋养层，C错误；胚胎移植前不需要对供体和受体进行免疫检查，因为受体子宫对移人的胚胎基本不会发生免疫排斥反应，D正确。
15.答案：C
解析：A、胚胎分割可产生多个胚胎，胚胎移植是让早期胚胎实现空间上的转移，均无法实现跨物种的基因交流，A错误；B、内细胞团存在于囊胚中，B错误；C、胚胎移植从理论上可将不同性状的多个早期胚胎移植到同一代孕母体子宫内，这样可分娩出性状不同的幼体，C正确；D、试管婴儿是指采用人工方法让卵母细胞和精子在体外受精，并进行早期胚胎发育，然后移植到母体子宫内发育而诞生的婴儿，D错误。故选C。
16.答案：D
解析：A、①代表体外受精，体外受精和体内受精前精子都需要获能，A错误；B、②代表早期胚胎培养，该过程中细胞进行有丝分裂和分化，B错误；C、③代表胚胎分割，需均等分割囊胚的内细胞团，以免影响胚胎发育，C错误；D、DNA分析鉴定性别须从胚胎的滋养层部位取样，这样既保证了遗传信息一致，又不影响内细胞团进一步发育，D正确。故选D。
17.答案：（1）维持培养液pH的相对稳定
（2）染色体的着丝粒排列在赤道板上；卵母细胞的采集、精子的获取
（3）桑葚胚
（4）促进
（5）5；该浓度下核成熟卵子数占卵母细胞数的比例最高，囊胚数占培养卵数的比例最高
解析：（1）动物细胞培养时，细胞培养箱中加5%CO2的作用是维持培养液pH的相对稳定。
（2）根据题意，卵母细胞培养到减数分裂Ⅱ中期时视为成熟，而减数分裂Ⅱ中期的染色体行为特征是染色体的着丝粒排列在赤道板上。哺乳动物的体外受精过程主要包括卵母细胞的采集、精子的获取和受精等主要步骤。
（3）早期胚胎发育过程为：受精卵→桑葚胚→囊胚→原肠胚。
（4）分析表格可知，与亚麻酸溶液浓度为0 μmol·L-1的组别（对照组）相比，亚麻酸溶液浓度为200 μmol·L-1时，核成熟卵子数占卵母细胞数的比例较高，囊胚数占培养卵数的比例较高，说明此浓度的亚麻酸溶液对水牛卵母细胞体外成熟和囊胚发育起促进作用。
（5）分析表格可知，亚麻酸溶液浓度为50 μmol·L-1时，核成熟卵子数占卵母细胞数的比例最高，囊胚数占培养卵数的比例最高，因此50 μmol·L-1的亚麻酸对水牛卵母细胞体外成熟和囊胚发育都最有利。
18.答案：（1）脱分化；无菌、无毒；5%的空气和5%的CO2的混合气体
（2）MⅡ（减数第二次分裂中期）梯度离心、紫外线短时间照射、化学物质处理；桑葚胚或囊胚
（3）XX，XY或YY；将内细胞团均等分割；遗传物质相同，可以基本排除由基因不同造成的个体差异
解析：(1)卵细胞激活转化成phFSC,通过基因编辑技术获得具精子细胞核特点的phESC,获得甲,从而得到孤雌小鼠。精子激活转化成ahFSC,通过基因编辑技术获得具卵细胞细胞核特点的ahESC,获得乙,从而得到孤雄小鼠。卵细胞是高度分化的细胞,转化为孤雌胚胎干细胞phFSC相当于植物组织培养中的脱分化阶段。体外培养时,首先应保证其处于无菌、无毒的环境,除了适宜的营养物质、温度等条件外,还需要控制气体条件是95%空气与5%二氧化碳的混合气体,二氧化碳的主要作用是维持培养液的pH值。故答案为:脱分化,无菌、无毒,95%的空气和5%的CO2的混合气体。
(2)重组细胞时,需将去核卵母细胞培养至减数第二次分裂中期。要培育孤雄小鼠需要将精子和具卵细胞细胞核特点的ahESC同时注入去核的卵母细胞形成重构胚,在对卵母细胞进行去核时,除了显微操作外,还可以采用梯度离心、紫外线短时间照射、化学物质处理等方法处理,得到的重构胚通常需要发育到桑葚胚或囊胚阶段才能进行胚胎移植,因为此时的胚胎易操作,且处于游离状态。故答案为:MII(减数第二次分裂中);梯度离心、紫外线短时间照射、化学物质处理;桑葚胚或囊胚。
(3)不考虑致死,孤雌小鼠具有双母亲来源,因此其染色体组成为XX,而孤雄小鼠的染色体来源于两只雄鼠产生的精子,精子的性染色体为X或Y,所以其性染色体可能是XX、XY或YY。在分割囊胚阶段的胚胎时,要注意将内细胞团均等分割,否则会影响胚胎的进一步恢复和发育。利用胚胎分割的方法对乙进行处理得到了多只孤雄小鼠,这些小鼠遗传物质相同,所以作为实验材料可以排除由基因的差异造成的个体差异,进而可以通过这些遗传背景相同的个体进行对比来分析致病原因。故答案为:XX,XY或YY;将内细胞团均等分割;遗传物质相同,可以基本排除由基因不同造成的个体差异

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