资源简介

（1）发酵工程的培养基和无菌技术
——高二生物学苏教版（2019）选择性必修三期末易错题集训
【易错点分析】
一、培养基相关易错点
1.培养基成分理解不到位
(1)易错点：混淆碳源、氮源的类型及作用，对特殊营养物质的需求认识不足。如认为所有微生物都能利用无机碳源，不清楚自养型微生物和异养型微生物在碳源需求上的差异；或者不明白某些微生物需要额外添加生长因子的原因
(2)分析：自养型微生物能利用无机碳源，如二氧化碳等，而异养型微生物需要有机碳源，如糖类等。有些微生物自身不能合成某些维生素、氨基酸等生长因子，需要在培养基中添加，否则无法正常生长
2.培养基类型区分不准确
(1)易错点：不能清晰分辨不同类型培养基的特点和用途。例如，将选择培养基和鉴别培养基的功能混淆，不知道选择培养基是用于分离特定微生物，而鉴别培养基是用于区分不同类型微生物
(2)分析：选择培养基是通过特定的营养成分或添加某种化学物质，抑制不需要的微生物生长，从而分离出所需微生物；鉴别培养基则是加入特定的指示剂或化学药品，使不同微生物在培养基上呈现出不同的特征，以便鉴别
3.培养基配制过程不规范
(1)易错点：在培养基配制过程中，对各步骤的操作要点和顺序掌握不好。如调节 pH 的时机不对，先分装再调节 pH，可能导致各分装部分 pH 不一致；或者在倒平板时，操作不规范，使培养基溅到皿盖与皿底之间，造成污染
(2)分析：应先调节培养基的 pH，再进行分装。倒平板时，要使锥形瓶的瓶口通过酒精灯火焰，用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，将培养基倒入培养皿，避免培养基溅到皿盖与皿底之间，平板冷凝后要倒置
二、无菌技术相关易错点
1.消毒和灭菌概念混淆
(1)易错点：不清楚消毒和灭菌的区别，包括使用的方法、达到的效果以及适用范围等。例如，认为用酒精擦拭桌面就能达到灭菌的效果，或者将接种环的灼烧灭菌当成消毒
(2)分析：消毒是使用较温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包括芽孢和孢子），而灭菌是使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。酒精擦拭桌面属于消毒，不能杀死所有微生物；接种环灼烧是灭菌方法，可杀死接种环上的所有微生物
2.无菌操作技术不熟练
(1)易错点：在进行接种、平板划线等操作时，没有严格遵循无菌操作要求。如在接种时，没有将接种环在火焰上灼烧灭菌，或者在划线操作时，划线用力过大将培养基划破，导致杂菌污染
(2)分析：接种环在使用前、每次划线前以及划线结束后都要进行灼烧灭菌，以防止杂菌污染。划线时用力要适当，避免划破培养基，影响微生物的生长和分离
3.对无菌技术的重要性认识不足
(1)易错点：不理解无菌技术在发酵工程中的关键作用，在实验过程中忽视一些细节，如实验器具的灭菌不彻底，或者在非无菌环境中进行操作
(2)分析：无菌技术是获得纯净微生物培养物的关键，如果杂菌污染了培养基或培养物，会与目标微生物竞争营养物质和生存空间，甚至产生毒素或代谢产物，影响目标微生物的生长和产物的生成，导致实验失败或生产效率降


【易错点练习】
1.下表所示为某微生物培养基的配方，有关叙述错误的是( )
成分
含量
成分
含量
NaNO3
3g
FeSO4
0.01g
K2HPO4
1g
葡萄糖
30g
琼脂
15g
H2O
1000mL
MgSO4?7H2O
0.5g
青霉素
0.1万单位
A.依物理性质划分，该培养基属于固体培养基；依用途划分，该培养基属于选择培养基
B.由培养基的原料可知，所培养微生物的同化作用类型是异养型
C.本培养基中青霉素的添加满足了微生物生长对特殊营养物质的要求
D.若用该培养基分离能分解尿素的细菌，应除去青霉素和NaNO3，并应加入尿素
2.下列关于培养基类型的叙述错误的是( )
A.天然培养基由动植物组织或微生物细胞以及它们的提取物或粗消化物配制而成
B.合成培养基的优点是化学成分明确，配制过程简单，成本较低
C.牛肉膏蛋白胨培养基既是一种天然培养基又是一种基础培养基
D.选择培养基可以将某种或者某类微生物从混杂的微生物群体中分离出来
3.下列是关于配制牛肉膏蛋白胨培养基的说法，正确的是( )
A.称取牛肉膏时，可将其放在小烧杯，或滤纸上称量
B.在琼脂溶化的过程中，需不断搅拌，以防琼脂糊底使烧杯破裂
C.配制好的培养基经灭菌后，可用盐酸或NaOH溶液调节pH
D.高温灭菌后，需要加入适量无菌水来补足因蒸发而流失水分
4.下列关于微生物培养基的叙述，正确的是( )
A.培养基是为微生物的生长繁殖提供营养的基质
B.培养基中的营养物质浓度越高，对微生物的生长越有利
C.固体培养基中加入少量水即可制成液体培养基
D.在培养细菌时，一般需要将培养基调至酸性
5.如表是微生物培养基的成分。下列有关说法错误的是( )
编号
①
②
③
④
⑤
成分
（NH4）2SO4
KH2PO4
FeSO4
CaCl2
H2O
含量/g
0.4
4.0
0.5
0.5
100mL
A.此培养基可用来培养自养型微生物
B.此表中的营养成分共有三类，即水、无机盐、氮源
C.若除去①，此培养基可培养硝化细菌
D.培养基中若加入氨基酸，则它可充当碳源、氮源
6.野生型菌株X能在基本培养基上生长，亮氨酸缺陷型突变株无法合成亮氨酸，只能在完全培养基上生长。如图是运用影印培养法（一种类似“盖章”的接种方法，使一系列培养皿的相同位置上能出现相同菌落）纯化亮氨酸缺陷型突变株的部分流程图，1～5为菌落。下列叙述不正确的是( )

A.培养基A是基本培养基，培养基B是完全培养基
B.在基本培养基中添加亮氨酸可制成完全培养基
C.可从培养基A中挑取菌落3、5进行纯化培养
D.若要影印多个平板，要注意“盖章”的方向不能改变
7.如图是微生物平板划线示意图，划线的顺序为3→4→5,下列说法正确的是( )
A.除第一次划线外，每次三划线的始端需与上次划线的末端相交
B.平板划线法不仅可以纯化菌种，还可以用于微生物计数
C.每次划线前都需要灼烧接种环，划线后则不需要
D.只有在5区才可以得到所需菌落
8.在生产生活和科研中，经常通过无菌技术避免杂菌的污染。下列叙述正确的是( )
A.通过消毒或灭菌，可杀死所有的微生物，包括孢子和芽孢
B.接种环、涂布器等接种用具的灭菌方式只有灼烧灭菌
C.为避免污染，接种等操作尽量在超净工作台上并在酒精灯火焰附近进行
D.对于牛奶等不耐高温的液体，一般采用紫外线照射法进行消毒
9.研究深海独特的生态环境对于开发海洋资源具有重要意义。我国科学家从深海冷泉附近的沉积物样品中分离、鉴定得到拟杆菌X，然后使用不同碳源的培养基对拟杆菌X进行培养，实验结果如图所示。相关叙述正确的是( )

A.实验中培养拟杆菌X需要提供充足的氧气条件
B.若要尽快扩大培养拟杆菌X，最好选择以淀粉为碳源的培养基
C.研究人员扩大培养拟杆菌X前，需采用干热灭菌法对培养基进行灭菌
D.实验结束后，使用过的培养基应经灭菌处理后再丢弃
10.为了调查湖水中细菌的污染情况，某小组同学进行了相关实验,其中包括制备培养基、灭菌、接种、培养及菌落观察、计数。下列叙述错误的是( )
A.牛肉膏蛋白胨培养基中的蛋白胨主要为细菌提供碳源、氮源等
B.配制好的培养基，分装到锥形瓶，放入高压蒸汽灭菌锅灭菌
C.培养接种无菌水的平板作为对照，可检验培养基的灭菌是否合格
D.若实验组平板上出现形态和颜色不同的菌落，说明湖水遭受严重污染
11.在做分离分解尿素的细菌实验时，甲同学从对应稀释倍数为106的培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只筛选出大约50个菌落。下列有关叙述，出现科学性错误的是( )
A.甲同学出现这种结果的原因可能是土样不同，也可能是操作过程出了问题
B.可以将甲同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养作为空白对照，以检测培养基是否受到污染
C.如果其他同学用与甲同学一样的土样进行实验，结果与甲同学一致，则可以证明甲同学无误
D.B、C项的实验思路都遵循了实验的对照原则
12.灭菌、消毒、无菌操作是生物学实验中常见的操作。下列叙述正确的是( )
A.动、植物细胞DNA的提取必须在无菌条件下进行
B.微生物、动物细胞培养基中需添加一定量的抗生素以防止污染
C.为防止蛋白质变性，不能用湿热灭菌法对牛肉膏蛋白胨培养基进行灭菌
D.可用湿热灭菌法对实验中所使用的微量离心管、细胞培养瓶等进行灭菌
13.随着咖啡豆销量的增加，产生大量咖啡果皮果肉等附属产物。咖啡果皮果肉营养物质丰富，可将其加工成果醋。某研究小组利用含葡萄糖和酒精成分的M和N培养基，从自然发酵的咖啡果醋中分离出产酸能力高的醋酸菌，工艺流程大致如下。

下列叙述错误的是( )
A.培养基M、N均需要在121℃下灭菌
B.过程②应采用稀释涂布法进行接种
C.培养基N比培养基M中多了凝固剂
D.过程③挑取菌落与透明圈直径比值小的单菌落
14.甲、乙、丙是三种微生物,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ是用来培养微生物的三种培养基(如下表)。甲、乙、丙都能在Ⅲ中正常生长繁殖;甲能在Ⅰ中正常生长繁殖,而乙和丙都不能;乙能在Ⅱ中正常生长繁殖,甲、丙都不能。下列说法正确的是(???)
蔗糖10g
(NH4)2SO4g0.4g
H2O100mL
其他无机盐
Ⅰ
+
-
+
+
Ⅱ
-
+
+
+
Ⅲ
+
+
+
+
注:“+”表示有,“-”表示没有,其他无机盐的种类与质量均相同。
A.甲、乙、丙都是异养微生物
B.甲、乙都是自养微生物,丙是异养微生物
C.甲是异养微生物,乙是固氮微生物,丙是自养微生物
D.甲是固氮微生物,乙是自养微生物,丙是异养微生物
15.我国卫生部门规定饮用水标准是1mL自来水中菌落总数不超过100个（37℃培养24h）,100mL自来水中不应检出大肠杆菌（37℃培养48h）。水中大肠杆菌的含量常采用伊红—亚甲蓝琼脂培养基进行检测，生长在此培养基上的大肠杆菌菌落呈深紫色且带有金属光泽。某校生物兴趣小组开展校园生活饮用水微生物含量检测活动，请回答下列问题：
（1）为了检测饮用水中细菌的数量，该兴趣小组按如表配方配制伊红—亚甲蓝琼脂培养基：
成分
蛋白胨
乳糖
磷酸氢二钾
琼脂
蒸馏水
25%伊红水溶液
0.5%亚甲蓝水溶液
含量
10g
10g
2g
20~30g
1000mL
20mL
13mL
从物理状态和用途两个角度分析，该培养基分别属于_____培养基，其中蛋白胨可以为细菌生长提供_____（至少写出两点）等营养物质。培养基灭菌_____（填“前”或“后”）需要调节pH。
（2）某同学分别向3个培养基中各加入1mL未经稀释的待测水样，涂布均匀后置于37℃的恒温培养箱中培养24h，结果如图1所示。检测时使用的接种量为1mL而不是0.1mL，其理由是_____。
（3）图2为用滤膜法测定饮用水中大肠杆菌数目的流程示意图，请完成下表。
各实验步骤的目的
简要操作过程
①_______
将滤膜放入装有蒸馏水的烧杯中，加热煮沸15min，共煮沸三次
过滤细菌
装置安装好后，向漏斗内加入100mL水样，加盖抽滤
冲洗漏斗壁
再向漏斗内加适量②____继续抽滤
培养大肠杆菌
用无菌镊子取出滤膜，将其紧贴在伊红一亚甲蓝琼脂平板上，然后将平板③_____，37℃培养48小时
统计大肠杆菌菌落数
选取④____的菌落进行计数，统计结果为0个
（4）综合以上测定结果，你认为所测生活饮用水的微生物含量_____（填“能”或“不能”）达到饮用水卫生标准，理由是_____。
16.米诺环素（分子式：C23H27N3O7）是一种四环素类抗生素，一般用于人类疾病治疗和畜禽养殖。米诺环素进入人体或动物体内后不能完全被吸收，其进入环境后会在环境中残留，造成环境污染。某研究人员在自然水域中通过筛选和分离得到了一种米诺环素高效降解菌DM13，并对该菌进行了相关研究。如表是相关过程中使用的培养基种类及培养基配方，回答下列问题。
培养基种类
配方
BPM培养基
蛋白胨5.0g、牛肉膏3.0g、氯化钠5.0g，蒸馏水定容至1000mL
BPMA培养基
蛋白胨5.0g、牛肉膏3.0g、氯化钠5.0g、琼脂25.0g，蒸馏水定容至1000mL
无机盐培养基
MgSO4·7H2O 0.15g、FeSO4·7H2O 0.01g、CaCl2 0.02g、KH2PO4 1g、Na2HPO4 1g、 NH4NO3 1g、葡萄糖 0.5g,蒸馏水定容至1000mL
（1）培养基的配制：按配方通过计算、称量、溶解等步骤配制培养基，培养基经____________灭菌后使用。
（2）扩大培养：在BPM培养基中添加一定浓度的____________，对采集的水样中的微生物进行选择培养，该物质可以为微生物生长提供____________。
（3）分离高效降解菌：用__________法接种经上述选择培养得到的微生物，该步骤选择的培养基为__________（填“BPM”“BPMA”或“无机盐”）培养基。
（4）测定降解效果：为了测定菌株DM13在自然水体中降解米诺环素的效果，应该用___________________配制四种不同初始质量浓度的米诺环素溶液。进行实验：
①8h处理后，在米诺环素溶液初始质量浓度为100μg/L的水体中，空白对照组测得的米诺环素溶液质量浓度为41.8μg/L，加入菌株DM13的实验组测得的质量浓度为24.3μg/L，相较于空白对照组，米诺环素降解菌DM13的降解率为______________（用百分数表示，保留一位小数）。
②为了测定菌株DM13的实际降解效果，可选择表中的无机盐培养基替换自然水体，这样做的目的是__________________________________________。
答案以及解析
1.答案：C
解析：A、从培养基成分看，配方中含有凝固剂琼脂，属于固体培养基；依用途划分，该培养基中加入青霉素，因此属于选择培养基，指一类根据特定微生物的特殊营养要求或其对某理化因素抗性的原理而设计的培养基，具有只允许特定的微生物生长，而同时抑制或阻止其他微生物生长的功能，A正确；
B、由培养基的原料可知，葡萄糖属于有机碳源，因此所培养微生物的同化作用类型是异养型，B正确；
C、青霉素是抗生素，本培养基中青霉素的添加是为了筛选能够抗青霉素的微生物，C错误；
D、若用该培养基分离能分解尿素的细菌，应以尿素为唯一氮源，因青霉素有杀菌作用，故应除去青霉素和碳酸氢钠，并应加入尿素，D正确。
2.答案：B
解析：A、由动植物组织或微生物细胞以及它们的提取物或粗消化物配制而成的培养基是天然培养基，A正确;B、合成培养基的优点是化学成分明确，配制过程简单，成本较高，B错误;C、牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用十分广泛的天然培养基，由于营养丰富，又是一种基础培养基，C正确;D、选择培养基是根据某一种或某一类微生物的特殊营养要求或对一些物理、化学抗性而设计的培养基。利用这种培养基可以将所需要的微生物从混杂的微生物中分离出来，D正确。
3.答案：B
解析：A、牛肉膏比较粘稠，需放在称量纸上称量，将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯，A错误；
B、琼脂溶化后较粘稠，所以在琼脂溶化的过程中，需用玻璃棒不断搅拌，以防琼脂糊底使烧杯破裂，B正确；
C、应先用盐酸或NaOH溶液调节pH，再将培养基灭菌，C错误；
D、高温灭菌过程中，装培养基的容器是用棉塞塞好的，所以不需要加入适量无菌水来补足因蒸发而流失的水分，D错误。
故选B。
4.答案：A
解析：培养基的营养成分一般都含有碳源、氮源、水、无机盐，是为微生物的生长繁殖提供营养的基质,A正确;培养基中各营养物质之间的浓度配比直接影响微生物的生长繁殖，故营养物质的浓度应适宜,B错误;固体培养基中含有凝固剂(琼脂),加入水不会制成液体培养基,C错误;不同微生物培养基的pH不一定相同,D错误。
5.答案：C
解析：异养型微生物必须从环境中摄取现成的有机物才能生存，此培养基中没有任何有机物，因此可用来培养自养型微生物，A正确；此表中的营养成分共有三类，即水、无机盐、氮源，B正确；硝化细菌利用的氮源是NH3，可将氧化成HNO2，进而将HNO2氧化成HNO3，可见，除去①，此培养基不能用来培养硝化细菌，C错误；氨基酸中含有C和N，因此培养基中的氨基酸可充当碳源、氮源，D正确。
6.答案：A
解析：A、由题干可知，亮氨酸缺陷型突变株无法在基本培养基上生长，但是可以在完全培养基上生长，与A相比，B中缺少了3、5两个菌落，说明3、5菌落即是亮氨酸缺陷型突变株繁殖而来的，A为完全培养基，B为基本培养基，A错误；B、在基本培养基中添加亮氨酸，则亮氨酸缺陷型突变株即可生长繁殖形成菌落，即制成了有利于其生长的完全培养基，B正确；C、由图可知，3和5菌落是亮氨酸缺陷型突变株生长繁殖形成的，因此从培养基A中挑取菌落3、5进行纯化培养即可获得亮氨酸缺陷型突变株，C正确；D、若要影印多个平板，要注意“盖章”的方向不能改变，防止菌落位置不一致，无法进行比较，D正确。故选A。
7.答案：A
解析：第二次及以后的划线总是从上次划线的末端开始，使微生物的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细胞繁殖而来的菌落，A正确；平板划线法可用于纯化菌种，由于该方法不能使微生物完全分离，因此不能用于微生物的计数，B错误；每次划线前和全部划线结束时都需要灼烧接种环，防止杂菌污染，清除残留在接种环上的菌种，C错误；由题图可知，5区域是最后一个区域，有可能在5区域获得单菌落，但其他区域也可能形成单菌落，D错误。
8.答案：C
解析：只有通过灭菌，才可以将所有的微生物，包括孢子和芽孢都杀死，A错误；接种环、涂布器等接种用具除了灼烧灭菌外，也可用高压蒸汽灭菌，B错误；为避免环境污染，接种等操作尽量在超净工作台上并在酒精灯火焰附近进行，超净工作台台面每次实验前要用75%酒精擦拭，然后紫外线消毒30min,C正确;对于一些不耐高温的液体，如牛奶，一般采用巴氏消毒法，D错误。
9.答案：D
解析：A、拟杆菌X为深海微生物，需要在无氧条件下进行培养，故实验中培养拟杆菌X不需要提供充足的氧气条件，A错误；
B、分析题图可知，以纤维素为碳源的培养基中拟杆菌X数量最多，故若要尽快扩大培养拟杆菌X，最好选择以纤维素为碳源的培养基，B错误；
C、研究人员扩大培养拟杆菌X前，需对培养基进行灭菌，灭菌一般采用湿热灭菌法，C错误；
D、实验结束后，使用过的培养基不能直接丢弃，应经灭菌处理后再丢弃，以免污染环境，D正确。
故选D。
10.答案：D
解析：牛肉膏蛋白胨培养基中的牛肉膏和蛋白胨含有糖、维生素和有机氮，主要为微生物提供碳源、氮源和维生素等，A正确；配制好的培养基，分装到锥形瓶，加上棉塞，包上牛皮纸，用皮筋勒紧，放入高压蒸汽灭菌锅灭菌，B正确；要使该实验所得结果可靠，可将接种无菌水的平板作为对照，和接种的平板一起培养，若有菌落产生，则说明灭菌不合格，C正确；若实验组平板上出现形态和颜色不同的菌落，说明湖水中存在不同种类的微生物，但不能据此判断湖水遭受严重污染，D错误。
11.答案：D
解析：甲同学获得的菌落数目远大于其他同学，原因可能是所取的土样不同，也可能是操作过程中培养基被污染，A正确；污染可能是培养基灭菌不彻底，或操作过程没有保证无菌操作，将甲同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养作为空白对照，可以检测培养基是否受到污染，B正确；若是土样不同造成的，让其他同学用与甲同学一样的土样进行实验，如果结果与甲同学一致，则可以证明甲同学操作正确，C正确；B选项的实验思路遵循了实验的对照原则，C选项的实验思路遵循了实验的重复性原则，D错误。
12.答案：D
解析：A、动、植物细胞DNA的提取不需要在无菌条件下进行，A错误；
B、动物细胞培养基中需添加一定量的抗生素以防止污染，保证无菌环境，而微生物的培养不能加入抗生素，B错误；
C、一般用湿热灭菌法对牛肉膏蛋白胨培养基进行灭菌，以防止杂菌污染，C错误；
D、可用湿热灭菌法对实验中所使用的微量离心管、细胞培养瓶等进行灭菌，以防止杂菌污染，D正确。
故选D。
13.答案：A
解析：A、M培养基加了葡萄糖，而葡萄糖不耐高温，需要过滤除菌，或降低温度延长灭菌时间，A错误；
B、过程②是分离得到单菌落，应采用稀释涂布法进行接种，B正确；
C、培养基N是固态，而扩大培养一般使用液态培养基，所以培养基N比培养基M中多了凝固剂，C正确；
D、过程③挑取菌落与透明圈直径比值小的单菌落，代表分解能力强，D正确。
故选A。
14.答案：D
解析：从题表中可看出,培养基Ⅰ中无氮源,培养基Ⅱ中无碳源,Ⅲ为完全培养基。由此可知,能在Ⅰ中正常生长繁殖的甲是固氨微生物;能在Ⅱ中正常生长繁殖的乙是自养微生物;不能在Ⅰ、Ⅱ中正常生长繁殖,只能在Ⅲ中正常生长繁殖的丙是异养微生物,故D正确。
15.答案：（1）固体培养基和鉴别；碳源、氮源、维生素；前
（2）待测水样中细菌数目较少，接种0.1mL经培养后平板上菌落数可能达不到30
（3）①滤膜消毒；②无菌水；③倒置；④呈深紫色且带有金属光泽
（4）能；1mL水样中菌落总数约为98个，没有超过100个；100mL水样中大肠杆菌菌落数为0个，没有检出大肠杆菌
解析：（1）从物理状态来看，该培养基含有琼脂作为凝固剂，属于固体培养基：从用途来看，培养基中含有伊红—亚甲蓝，用于鉴别是否存在大肠杆菌，所以该培养基属于鉴别培养基：蛋白胨富含有机氨化合物，也含有一些维生素和糖类，故蛋白胨可以为细菌生长提供碳源、氮源、维生素等营养物质：培养基灭菌前需要调节pH，一般培养基高温高压对其pH的影响不大，且灭菌后调pH易污染培养基。
（2）利用稀释涂布平板法进行计数时，需要平板上菌落数是30~300。检测时使用的接种量为1mL而不是0.1mL，其理由是水样中细菌数目较少，接种0.1mL经培养后平板上菌落数可能达不到30。
（3）①“将滤膜放入装有蒸馏水的烧杯中，加热煮沸15min，共煮沸三次”，煮沸能起到消毒的作用，故该步骤的目的是对滤膜进行消毒：②为了避免大肠杆菌遗留在漏斗壁上，需要向漏斗内加适量的无菌水，继续抽滤；③将平板倒置，既可避免培养基表面水分快速挥发，又能防止冷凝水滴到培养基上影响菌落生长及形态；④由题意可知，伊红—亚甲蓝培养基可用于检测大肠杆菌，大肠杆菌菌落在此培养基上呈深紫色且带有金属光泽，故需选取呈深紫色且带有金属光泽的菌落进行计数。
（4）由图1可知，第（2）题中3个平板的菌落数的平均值为98，取样体积为1mL；第（3）题中平板上大肠杆菌菌落数为0，取样体积为100mL。综合以上测定结果，以及题干我国卫生部门规定的饮用水标准可知，所测生活饮用水的微生物含量能达到饮用水卫生标准。
16.答案：（1）高压蒸汽
（2）米诺环素溶液；碳源、氮源
（3）平板划线法或稀释涂布平板；BPMA
（4）自然水体中的水；41.9%；排除自然水体中其他微生物的影响
解析：（1）培养基常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌。
（2）分析题意可知，该步骤的目的是筛选并扩大培养能降解米诺环素的降解菌，故应在BPM培养基中添加一定浓度的米诺环素溶液。米诺环素的分子式是C23H27N3O7,由此可知其可为微生物的生长提供碳源和氮源。
（3）分离高效降解菌时，接种方法可采用平板划线法或稀释涂布平板法，此时应选用固体培养基，固体培养基中含有凝固剂琼脂，故该步骤选择的培养基为BPMA培养基。
（4）分析题意，要测定菌株DM13在自然水体中降解米诺环素的效果，应该用自然水体中的水配制四种不同初始质量浓度的米诺环素溶液。①8h处理后，在米诺环素溶液初始质量浓度为100ug/L的水体中，空白对照组测得的米诺环素溶液质量浓度为41.8μg/L，加入菌株DM13的实验组测得的质量浓度为24.3μg/L，相较于空白对照组，米诺环素降解菌DM13的降解率为[（100-24.3）-（100-41.8）]÷41.8×100％≈41.9％。②为了测定菌株DM13的实际降解效果，应选择表中的无机盐培养基替换自然水体，这样可排除自然水体中其他微生物的影响。

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