资源简介

1.下列关于人体内环境的叙述正确的是()
A.内环境中发生丙酮酸的氧化分解为细胞提供了能量，有利于生命活动的进行
B静脉注射一定量生理盐水后，机体血浆渗透压会上升
C.血浆和淋巴液都是免疫细胞生存的内环境
D.大面积烧伤患者创面会大量渗出细胞外液，通常需给患者输入红细胞悬浮液来维持内环境
稳态
答案：C
2.液体疗法是指通过补充或限制某些液体以维持机体体液平衡的治疗方法。临床上，常用5%
葡萄糖溶液（血浆等渗溶液）、10%葡萄糖溶液、5%NHC0,溶液等进行输液治疗。下列相关说法
错误的是()
A.治疗酸中毒时，5%NaHC0溶液能直接起到改善患者血浆pH作用
B.特殊情况下如低血糖时，使用10%葡萄糖溶液主要为患者提供能量
C.注射5%葡萄糖溶液后，若葡萄糖大量消耗会导致患者的渗透压升高
D.液体疗法的目的是恢复或维持患者正常的体液容量、成分和理化特性
答案C
3.人在胆囊病变初期，常出现右肩胛区疼痛，机制如图。相关叙述正确的是()
A.该反射为非条件反射，感受器为胆囊
大脑
B.图中①、②分别为相关神经元的树突和轴突
右肩胛d
C.动作电位首先产生于胆囊，传导途径为a→b→c→d
D.痛觉的形成应在大脑皮层中央前回的躯体感觉中枢
胆囊
答案B
4神经元的相关结构如图所示，下列说法错误的是()
突志
1
细胞核
++女
甲
++
A.神经元是神经系统结构与功能的基本单位，由细胞体和突起等部分构成
B.在正常机体内，神经冲动在①处能以电信号形式单向传导
试卷第1页，共15页
C.甲中，当神经纤维处于b处状态时，膜外Na+浓度低于膜内
D.丙中，②向突触前膜移动，并能以胞吐的方式释放神经递质
【答案】C
5.科学家以果蝇为实验材料揭示了AC-DN1P-PI神经介导的高温促进夜间觉醒的调控过程，如
图所示。高温使阳离子通道蛋白TrpA1被激活，AC神经元产生兴奋，通过神经传导最终抑制PI
神经元兴奋，从而促进夜间觉醒，下列分析正确的是(
AC神经元
人，DNIP神经元
PI神经元
Ach
CNMa
TpA1通道
A.高温引起夜间觉醒的过程中，兴奋在神经纤维上双向传导
B.神经递质CNa与其受体结合不会使PI神经元发生电位变化
C.干扰AC神经元中TrpA1的合成会使高温促进夜晚觉醒的作用减弱
D.用药物抑制CNMa的合成和释放，可降低高温环境中的睡眠质量
答案C
6.某同学选用新鲜成熟的葡萄制作果酒和果醋。下列相关叙述正确的是()
A.果酒发酵时，每日放气需迅速，避免空气回流入发酵容器
B.果酒发酵时，用斐林试剂检测葡萄汁中还原糖含量变化，砖红色沉淀逐日增多
C.果醋发酵时，发酵液产生的气泡量明显少于果酒发酵时
D,果醋发酵时，用重铬酸钾测定醋酸含量变化，溶液灰绿色逐日加深
答案C
7、发酵乳中含有丰富的乳酸菌。科研人员利用CaCO3-MRS培养基（蛋白胨10g、牛肉膏粉
5g、酵母膏粉4g、葡萄糖20g、磷酸氢二钾2g、乙酸钠5g、柠檬酸三铵2g、硫酸镁0.2g、
硫酸锰0.05g、琼脂15g、碳酸钙25g)从发酵乳中分离纯化乳酸菌，相关叙述正确的是()
A.能为乳酸菌提供碳源的有蛋白胨、牛肉膏粉、酵母膏粉、葡萄糖、琼脂
B.接种前应将发酵乳置于121℃、100kPa条件下处理1530min
C.涂布接种后应在培养皿盖上标记接种日期和接种者，并倒置培养
D.挑取溶钙圈直径与菌落直径比值较大的菌落进一步划线纯化
【答案】D
8、图示植物原生质体制备、分离和检测的流程。下列相关叙述正确的是()
试卷第2页，共15页2025 年春学期期中教学质量调研卷
高二年级 生物学科
卷面总分：100 分 考试时间：75 分钟
一、单项选择题：本部分包括 14 题，每题 2 分，共计 28 分。每题只有一个选项最符合题意。
1.下列关于人体内环境的叙述正确的是( )
A.内环境中发生丙酮酸的氧化分解为细胞提供了能量,有利于生命活动的进行
B.静脉注射一定量生理盐水后,机体血浆渗透压会上升
C.血浆和淋巴液都是免疫细胞生存的内环境
D.大面积烧伤患者创面会大量渗出细胞外液,通常需给患者输入红细胞悬浮液来维持内环境稳态
2.液体疗法是指通过补充或限制某些液体以维持机体体液平衡的治疗方法。临床上,常用5%葡萄糖溶液(血
浆等渗溶液)、10%葡萄糖溶液、5%NaHCO3 溶液等进行输液治疗。下列相关说法错误的是( )
A.治疗酸中毒时,5%NaHCO3 溶液能直接起到改善患者血浆 pH 作用
B.特殊情况下如低血糖时,使用 10%葡萄糖溶液主要为患者提供能量
C.注射 5%葡萄糖溶液后,若葡萄糖大量消耗会导致患者的渗透压升高
D.液体疗法的目的是恢复或维持患者正常的体液容量、成分和理化特性
3.人在胆囊病变初期,常出现右肩胛区疼痛,机制如图。相关叙述正确的是( )
A.该反射为非条件反射,感受器为胆囊
B.图中①、②分别为相关神经元的树突和轴突
C.动作电位首先产生于胆囊,传导途径为 a→b→c→d
D.痛觉的形成应在大脑皮层中央前回的躯体感觉中枢
4.神经元的相关结构如图所示，下列说法错误的是（ ）
A. 神经元是神经系统结构与功能的基本单位，由细胞体和突
起等部分构成
B. 在正常机体内，神经冲动在①处能以电信号形式单向传导
C. 甲中，当神经纤维处于 b 处状态时，膜外 Na+浓度低于膜内
D. 丙中，②向突触前膜移动，并能以胞吐的方式释放神经递
质
试卷第 1 页，共 3 页
5.科学家以果蝇为实验材料揭示了 AC-DN1P-PI 神经介导的高温促进夜间觉醒的调控过程,如图所示。高温
使阳离子通道蛋白 TrpA1 被激活,AC 神经元产生兴奋,通过神经传导最终抑制 PI 神经元兴奋,从而促进夜间
觉醒,下列分析正确的是( )
A.高温引起夜间觉醒的过程中,兴奋在神经纤维上双向传导
B.神经递质 CNMa 与其受体结合不会使 PI 神经元发生电位变化
C.干扰 AC 神经元中 TrpA1 的合成会使高温促进夜晚觉醒的作用减弱
D.用药物抑制 CNMa 的合成和释放,可降低高温环境中的睡眠质量
6.某同学选用新鲜成熟的葡萄制作果酒和果醋。下列相关叙述正确的是( )
A.果酒发酵时,每日放气需迅速,避免空气回流入发酵容器
B.果酒发酵时,用斐林试剂检测葡萄汁中还原糖含量变化,砖红色沉淀逐日增多
C.果醋发酵时,发酵液产生的气泡量明显少于果酒发酵时
D.果醋发酵时,用重铬酸钾测定醋酸含量变化,溶液灰绿色逐日加深
7、发酵乳中含有丰富的乳酸菌。科研人员利用 CaCO3-MRS 培养基（蛋白胨 10g、牛肉膏粉 5g、酵母膏
粉 4g、葡萄糖 20g、磷酸氢二钾 2g、乙酸钠 5g、柠檬酸三铵 2g、硫酸镁 0.2g、硫酸锰 0.05g、琼脂 15g、
碳酸钙 25g）从发酵乳中分离纯化乳酸菌，相关叙述正确的是（ ）
A．能为乳酸菌提供碳源的有蛋白胨、牛肉膏粉、酵母膏粉、葡萄糖、琼脂
B．接种前应将发酵乳置于 121℃、100 kPa 条件下处理 15~30 min
C．涂布接种后应在培养皿盖上标记接种日期和接种者，并倒置培养
D．挑取溶钙圈直径与菌落直径比值较大的菌落进一步划线纯化
8、图示植物原生质体制备、分离和检测的流程。下列相关叙述正确的是( )
A.步骤①添加盐酸以去除细胞壁
B.步骤②吸取原生质体放入无菌水中清洗
C.原生质体密度介于图中甘露醇和蔗糖溶液密度之间
D.台盼蓝检测后应选择蓝色的原生质体继续培养
9.三白草和鱼腥草因疗效相近且具有叠加效应常被中
医用作“药对”。研究者欲利用原生质体融合技术将复方的配伍(两种或两种以上药物配合使用)提前到个体
生长或生产过程,并实现有效成分的工厂化生产,操作如图所示。下列有关叙述正确的是( )
A.①过程可用盐酸和酒精混合液(1∶1)配制的解离液来完成
B.②过程通常在略高渗溶液中采用灭活病毒诱导原生质体融合
C.③过程融合的原生质体需先形成细胞壁再进行有丝分裂
D.④过程配制培养基时需要添加植物生长调节剂和琼脂
10.乳腺癌、胃癌细胞表面有大量的 HER2 蛋白,T 细胞表面有 CD3 蛋白和 CD28 蛋白。研究人员利用上述
三种蛋白作为抗原分别制备单克隆抗体,然后将其在体外解偶联后重新偶联制备得到三抗(如图)。下列说
法正确的是( )
A.给小鼠同时注射三种抗原蛋白,可产生能同时分泌三种抗体的浆细胞
B.骨髓瘤细胞与免疫后的 B 细胞融合后产生的杂交瘤细胞均能产生特定抗体
C.三抗能同时与 T 细胞和肿瘤细胞特异性结合,促进了 T 细胞对肿瘤细胞的杀伤
D.三抗的肽链之间可通过二硫键相连,空间结构变化不影响其功能
11.研究人员制备了膀胱生物反应器,用其获得人体特殊功能蛋白 S,基本过程如图所示。下列相关叙述正确
的是( )
A.步骤①需要在 S 基因编码区上游添加乳腺蛋白基因启动子
B.步骤②需要在高 Ca2+—高 pH 条件下将 S 基因表达载体导入受精卵
C.步骤④可选择发育良好的囊胚,且代孕母体一般需要同期发情处理
D.与乳腺反应器不同的是膀胱生物反应器会受到转基因动物的性别和年龄的限制
12、下列关于哺乳动物胚胎工程和细胞工程的叙述,错误的是( )
A.细胞培养和早期胚胎培养的培养液中通常需添加血清等物质
B.早期胚胎需移植到经同期发情处理的同种雌性动物体内发育成个体
C.猴的核移植细胞通过胚胎工程已成功地培育出了克隆猴
D.将骨髓瘤细胞和 B 淋巴细胞混合,经诱导后融合的细胞即为杂交瘤细胞
13.像BclⅠ(-T↓GATCA-)、BglⅡ(-A↓GATCT-)、MboⅠ(-↓GATC-)这样,识别序列不同,但能产生相同的黏
性末端的一类限制酶被称为同尾酶。如图表示目的基因及质粒上的酶切位点。选用不同的限制酶对质粒
和目的基因进行切割,并用 DNA 连接酶进行连接。下列分析错误的是( )
选项 切割质粒 切割目的基因 结果分析
A BclⅠ和 BglⅡ BclⅠ和 BglⅡ 形成的重组质粒的碱基排列顺序不一定相同
切割后的质粒不可自我环化,切割后的目的基因可 B BclⅠ和 BglⅡ MboⅠ
以自我环化
形成的重组质粒可被 MboⅠ再次切开,但可能无法被 C MboⅠ BclⅠ和 BglⅡ
BclⅠ和 BglⅡ再次切开
切割后的质粒可以自我环化,切割后的目的基因也 D MboⅠ MboⅠ
可以自我环化
14.研究发现,若将第 52 位的脯氨酸(密码子为 CCA)替换成苏氨酸(密码子为 ACA),则可增强抗菌肽的抑菌性。
抗菌肽基因的部分碱基序列及可供选择的引物如图 1 所示,箭头下方的数字代表碱基序号。现利用重叠延
伸 PCR 技术对抗菌肽基因进行改造以获得抑菌性更强的抗菌肽,过程如图 2 所示,其中Ⅰ为转录模板链,引
物上的“ ”代表突变位点。改造过程中 PCR2 所使用的引物组合为( )
图 1 图 2
A.引物 1 和引物 4 B.引物 2 和引物 6 C.引物 2 和引物 4 D.引物 3 和引物 5
二、多项选择题：本部分包括 5 题，每题 3 分，共计 15 分。每题有不止一个选项符合题意。
每题全选对者得 3 分，选对但不全的得 1 分，错选或不答的得 0 分。
15.通过动物细胞工程技术，可以利用患者自身的细胞在体外诱导发育成特定的组织器官，然后再移植回
患者体内。图 1 和图 2 表示利用自身细胞进行器官移
植的两种方法，其中诱导多能干细胞（iPS 细胞）类
似于人类的胚胎干细胞。下列说法错误的是（ ）
A．相对于成纤维细胞，iPS 细胞分化程度低，分裂能力强
B．两种方法都需要运用动物细胞培养技术，通过对培养液和所有培养用具进行灭菌处理以保证无菌、无
毒的环境
C．利用两种方法所获得的组织器官的遗传物质与患者相同，移植后不会发生免疫排斥反应
D．利用获得的 iPS 细胞诱导出特定的组织器官，体现了 iPS 细胞的全能性
16.神经元释放的递质引起骨骼肌兴奋,下列相关叙述正确的有( )
A.该过程经历了“电信号→化学信号→电信号”的变化
B.神经元处于静息状态时,其细胞膜内 K+的浓度高于膜外
C.骨骼肌细胞兴奋与组织液中 Na+协助扩散进入细胞有关
D.交感神经和副交感神经共同调节骨骼肌的兴奋和舒张
17.大头菜是中国四大名腌菜之一,其制作流程为鲜菜→整理清洗→下缸→一次转缸→二次转缸→三次转缸
→一次腌晒(盐水/卤水)→二次腌晒(盐水/卤水)→三次腌晒(盐水/卤水)→四次腌晒(盐水/卤水)→五次腌晒
(盐水/卤水),盐水用量从 20%逐渐上升到 28%,卤水单次用量基本相同。下列叙述正确的是( )
A.在高盐密闭环境下,农家腌制大头菜的过程为单一菌种发酵
B.卤水可提升大头菜的色香,同时具有抑菌作用
C.多次转缸可使各层大头菜均匀发酵,同时避免热量积累
D.第五次腌晒时盐水用量达到 28%,有利于延长大头菜保质期
18.如图表示利用细胞融合技术进行基因定位的过程,在人—鼠杂种细胞中人的染色体会以随机方式丢失,通
过分析基因产物进行基因定位。现检测细胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ中人的 4 种酶活性,只有Ⅱ具有芳烃羟化酶活性,只
有Ⅲ具有胸苷激酶活性,Ⅰ、Ⅲ都有磷酸甘油酸激酶活性,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ均有乳酸脱氢酶活性。下列相关叙述
正确的有( )
A.加入灭活仙台病毒的作用是促进细胞融合
B.细胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ分别为人—人、人—鼠、鼠—鼠融合细胞
C.芳烃羟化酶基因位于 2 号染色体上,乳酸脱氢酶基因位于 11 号染色体上
D.胸苷激酶基因位于 17 号染色体上,磷酸甘油酸激酶基因位于 X 染色体上
19.关于“DNA 片段的扩增及电泳鉴定”实验，下列说法正确的是（ ）
A．根据 DNA 片段大小配置一定质量分数的琼脂糖溶液以便分离 DNA 分子
B．琼脂糖凝胶电泳中的缓冲液中含指示剂，其可以在紫外灯下被检测出来
C．实验中使用的微量离心管、枪头和蒸馏水等在使用前必须进行高压灭菌处理
D．扩增得到的 PCR 产物与凝胶载样缓冲液混匀后需缓慢注入加样孔以防样品飘散
三、非选择题：本部分包括 5 题，共计 57 分。
20．（12 分）发酵型青梅果醋的生产主要采用碱中和青梅汁之后再进行酒精发酵、醋酸发酵的方法，然
而这种生产工艺会损失青梅的功能性成分。因此，筛选能够耐受青梅高酸环境的醋酸菌是提高发酵青梅
果醋品质的关键（已知醋酸能与培养基中的碳酸钙反应生成能溶于水的醋酸钙）。请回答以下问题。
(1)食醋生产的三个主要的过程：一是原料中淀粉的分解，即糖化作用（水解）；二是酒精发酵，即
（填微生物名称）将糖转化成乙醇；三是醋酸发酵，即醋酸菌将乙醇转化成乙酸，该微生物的代谢类型
是 。
(2)①菌种筛选及发酵生产涉及三种培养基：
培养基 A 葡萄糖、酵母粉、无水碳酸钙、琼脂、3％乙醇
培养基 B 葡萄糖、酵母粉、3％乙醇
培养基 C 葡萄糖、酵母粉、6％乙醇
具体流程为：取腐烂一周的青梅若干，加入装有培养基 B 的摇瓶中培养一段时间，经 稀释后，接种
于培养基 A 上，选取 且生长良好的单菌落 10 株。将上述初筛的 10 株醋酸菌接种
于培养基 C 中，结果如图 1。研究者选择菌株 J-27 作为后续实验菌株，原因是 。（2 分）
②研究人员对 J-27 进行诱变处理，选取突变菌株 J-2736，与两种商业化的醋酸菌—沪酿 1.01、AS1.41 分
别接种于青梅果酒中进行青梅果醋发酵，结果如图 2。
沪酿 1.01 和 AS1.41 发酵结束时青梅果醋发酵液中总酸含量为 15g·L﹣1 左右，而两者应用于粮食醋发酵时，
发酵液总酸含量一般可以达到 50g·L﹣1 左右。推测原因可能是 。
③图 2 结果说明在青梅果醋发酵过程中，菌株 J-2736 发酵性能优于沪酿 1.01 和 AS1.41。研究人员继续对
J-2736 的发酵条件进行了研究，发现初始乙醇含量可能对青梅果醋发酵具有一定影响，实验结果如图 3。
由结果表明，初始乙醇含量较低或较高时，总酸含量分别是 ，试分析造成这种现象的原因：乙
醇含量过低， ；而乙醇含量过高， 。
(3) 乙醇脱氢酶（ADH）催化乙醇生成乙醛是醋酸发酵的第一阶段，乙醛脱氢酶（ALDH）催化乙醛生
成乙酸是醋酸发酵的第二阶段。某同学从 J-27 的突变体菌株中分别提取 ADH 和 ALDH，分别用高浓度的
乙醇处理后测酶活性，由此可根据 （2 分）进一步筛选出耐乙醇醋酸高产菌株。
21.（11 分）为寻找引发强烈药物渴求的机制，研究人员探究了有氧运动对尼古丁戒断小鼠 VTA（中脑腹
侧被盖区）多巴胺神经元兴奋传递效能的影响。图 1 表示与成瘾相关的多巴胺神经元与 GABA 能神经元之
间构成的突触。请回答下列问题。
(1)a 神经元末梢呈膨大的结构是 ，ab 神经元之间的突触类型是 。
(2)电刺激 b，a 上的电位表测得的膜电位变化如图 2 所示，由此判断 b 神经元释放的是 （填
“兴奋”或“抑制”）性神经递质，这表明 GABA 可引起突触后膜 （填“Na+”或“Cl-”）内
流。
(3)在成瘾行为形成过程中，成瘾性药物会 （填“增强”或“减弱”）VTA 多巴胺神经元中
多巴胺的释放，使机体产生强烈的愉悦感和正性强化作用从而启动成瘾机制。从突触的结构看，药物成
瘾机制还可能与 的减少有关。
(4)研究人员为探究有氧运动对尼古丁戒断模型 VTA 多巴胺神经元 GABA 输入的调节作用，进行了以下实验，
请完成下表。
实验目标 实验操作及结果分析
将所有小鼠适应性饲养 1 周后，随机均分为 4 组，每组 10 只，分别为生理盐水+安静组（SS
动物分组 组）、生理盐水+运动组（SE 组）、尼古丁+安静戒断组（NS 组）、尼古丁+运动戒断组
（NE 组）。
NS、NE 组小鼠第 2、4、6、8 天注射尼古丁（0.5mg/kg），在第 3、5、7、9 天注射等量生 ①
理盐水；SS、SE 组小鼠每天注射生理盐水。
停止给药后，SE 组和 NE 组小鼠连续 2 周进行有氧运动干预；SS 组和 NS 组②
。2 周戒断后，进行偏爱测试（CPP，即成瘾者的寻求用药的行为，CPP 得分越高，代表戒
断期寻求用药行为越强烈），结果如图所示。据图分析可知③ 。
偏爱测试
及分析
测定 GABA 记录 GABA 所产生的突触后电流，结果如下图。
突触后膜
据图分析，尼古丁戒断会④
电流及分
析
（填“增强”或“减少”）VTA 多巴胺神经元接受的 GABA 输入。有氧运动能使尼古丁戒断
小鼠 VTA 多巴胺神经元接受的 GABA 输入⑤ （填“增强”或“减少”）。
22.（10 分）动物可通过学习将条件刺激（CS）与非条件刺激（US）有效关联建立条件反射，能够建立条
件反射的 CS 和 US 间的最长时间间隔称为“一致性时间窗口”，简称“Tm”。研究人员利用果蝇的“气味-电击”
学习模型开展研究。
(1)果蝇对气味甲、乙的偏好无差异。利用下图1装置进行实验，探究气味甲与施加电击两种处理的时间间
隔对果蝇建立气味与电击关联的影响。先向训练臂通入气味甲并施加电击，置换新鲜空气之后通入气味
乙，训练后将果蝇转移至测试臂进行测试。
①电击会引发果蝇的躲避反应，属于 反射。实验中 作为条件刺激。若反复应用条件刺激
而不给予非条件刺激，条件反射就会消退，消退的机制是 。
②测试实验开始时，果蝇全部放在中间，一段时间后检测并计算左右测试臂果蝇数量差值占果蝇总数的
比例（PI），绘制曲线如图 2。时间间隔为 20s 时野生型果蝇的分布情况为 ，表示条件
反射的建立是否成功 （填“是”或“否”）。以 PI＝0.5 时的对应时间为果蝇将气味与电击建立关联
的 Tm， A、B、C 组的 Tm 大小关系为 ，说明 5-羟色胺（5-HT）水平升高能够
（填“缩短”或“延长”）Tm， （填“提升”或“降低”）果蝇的学习能力。
(2)气味和电击的感受器不同，位于果蝇脑区学习记忆中枢的K细胞可以同时获得这两种信息，释放乙酰胆
碱（Ach）作用于传出神经元。利用转基因技术，在果蝇 K 细胞的细胞膜上特异性表达荧光探针，该探针
结合 Ach 可产生荧光，实验证实建立气味—电击条件反射前后，气味信号使 K 细胞的乙酰胆碱释放量发生
改变。实验的正确操作顺序为： （选填下列序号）。
①气味甲刺激 ②气味乙刺激-10s 间隔-电击刺激 ③气味甲刺激-10s 间隔-电击刺激
④检测果蝇脑区荧光强度 ⑤检测果蝇脑区 5-HT 释放量
(3)自然界中，CS 与 US 之间的间隔是多变的，受 5-HT 机制调节的 Tm 是影响条件反射建立的重要因素，请
分析动物 Tm 过短对其适应环境的影响是 ，降低了动物适应复杂多变环境的能力。
23. （12 分）有些人由于不能完全消化牛奶中的乳糖，饮用牛奶后易出现腹泻等不适症状，这称为乳糖
不耐受。为了解决这一问题，科学家将肠乳糖酶基因导入奶牛受精卵，使获得的转基因奶牛分泌的乳汁
中，乳糖的含量大大降低，而其他营养成分不受影响。根据如下操作流程回答相关问题：
（1）为了获得更多的卵母细胞，在进行①过程前，需要用 处理奶牛 A，从输卵管中采集卵母
细胞后，还需要体外培养至 期，才可以进行③过程。通过图中②过程采集的 B 奶牛精子不能直
接使成熟的卵细胞受精，常用化学诱导法对奶牛的精子进行 处理，即用一定浓度的
或钙离子载体溶液处理。
（2）⑤过程表示将重组质粒导入受体细胞，常用的方法是 。当受精卵发育到 时，需要取
__________细胞进行性别鉴定，以确保发育成熟的牛能分泌乳汁。同时还要用基因探针与目的基因杂交，
以检测 。
（3）⑥过程在移植胚胎前，可以选择发育良好、形态正常的 进行胚胎分割。
（4）外源基因插入奶牛受精卵中的 DNA 上后，导致有的受精卵发育成转基因奶牛，有的会死亡。分析
导致受精卵死亡的最可能原因是 。⑦过程的检测结果为 (2 分)
时，说明转基因奶牛 D 是符合要求的优质牛。
24.（12 分）红斑丹毒丝菌是猪的病原性细菌（引起猪丹毒），其表面抗原 A 蛋白（SpaA）和胆碱结合蛋
白 B（CbpB）能诱导猪等产生特异性抗体。枯草芽孢杆菌是一种益生菌，为猪丹毒口服活载体疫苗的研
发奠定基础。研究人员构建重组质粒（过程如图 1）导入枯草芽孢杆菌，一段时间后分别收集菌体和芽孢
（抗逆性强，适宜条件下能萌发形成菌体），制备在菌体表面表达 SpaA 的重组菌体活载体疫苗、芽孢表
面表达 CbpB 的重组芽孢活载体疫苗，并通过小鼠免疫实验评价免疫效果。请回答下列问题：
（1）已知引物 R1 与引物 F2 部分序列互补配对，以便合成融合基因 spoⅢJ-spaA。其中 R1 的序列为 5
'-GCTGCCGCCACCGCCGCTTCCGCCACCGCCGCTTCCACCGCCACCCTTTTTCT-3'，则 PCR2 过程中构
建的引物 F2 的序列为______。（2 分）
①5'-GAGGAGCGAAAACCGAGAGACTTAGGGCCTACGCTATATATCG-3'
②5'-CGCTGGCGGAACCGGCGGTGGCGGCAGCGATTCGAC-3'
③5'-GCCACCGCCTTCCCCCCCACCGCCGTCGCTAAGCTG-3'
④5'-TTGGCTATGTTTTACGATTAGGCAGCGATTCGAC-3'
（2）已知过程⑦、⑧都用双酶切构建重组质粒，则设计 PCR1 时在引物 F1 的____端添加的限制酶识别序
列是_____。质粒 pDC 中 BamHⅠ和 EcoRⅠ之间的长度_____（填“大于”、“小于”或“等于”）MfeⅠ和
BelⅠ之间的长度。过程⑦、⑧不能同时在同一体系中进行的主要原因是_____，若同时进行，酶切后的连
接产物多。
（3）将重组质粒 pDG-CBJA 导入枯草芽孢杆菌，将发生如图 2 所示的同源重组过程，pDG 中的序列 A、
序列 B 的设计依据是______。
（4）对转化的枯草芽孢杆菌进行筛选时，应将菌种接种在含壮观霉素和______的平板上，37℃培养 24h，
加碘液，3min 后弃去碘液，观察菌落周围有无透明圈产生，选择______的菌落来制备疫苗。
（5）科研人员研究了不同疫苗体液免疫应答的效果，结果如图 3，A 组为磷酸缓冲液，B 组为野生型枯草
芽孢杆菌菌体，C 组为野生型枯草芽孢杆菌芽孢，D 组为重组枯草芽孢杆菌菌体活载体疫苗，E 组为重组
枯草芽孢杆菌芽孢活载体疫苗。
①五组实验中，______组为对照组。
②小鼠口服菌体活载体疫苗（表达 SpaA）后，血清抗 SpaA 抗体低；芽孢活载体疫苗不表达 SpaA，但小
鼠口服芽孢活载体疫苗后血清抗 SpaA 抗体较高，其原因是______。（2 分）

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