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江苏省淮安市马坝高级中学2024-2025学年高二下学期期中考试生物试题
一、单选题
1．在制作发酵食品的学生实践中，控制发酵条件至关重要。下列相关叙述正确的是（ ）
A．泡菜发酵后期，尽管乳酸菌占优势，但仍有产气菌繁殖，需开盖放气
B．葡萄果皮上有酵母菌和醋酸菌，制作好葡萄酒后，可直接通入无菌空气制作葡萄醋
C．制作果酒的葡萄汁不宜超过发酵瓶体积的2/3，制作泡菜的盐水要淹没全部菜料
D．果酒发酵的适宜温度是30～35℃，果醋发酵的适宜温度是18～30℃
2．《黄帝内经》中提到：“米酒甘甜，入肝经，能补血行气。”某品牌的甜酒曲中只有需氧型根霉菌，这种菌促进淀粉水解的能力强，产生酒精的能力较弱，因而用其制作的甜米酒甜味明显又略带酒香。下列相关叙述正确的是（ ）
A．可用根霉菌和酵母菌一起进行有氧发酵来提高甜米酒的酒精浓度
B．用适宜的选择培养基即可获得某种用于酿制米酒的优质根霉菌种
C．用纯根霉菌制作的甜米酒中只有酒精一种代谢产物因而更加安全
D．蒸好的米饭放至室温再添加甜酒曲可以防止根霉菌因高温而失活
3．从自然界中筛选具有优良性状的菌种的一般步骤为：采集样品→ 富集培养（使菌体数量增多）→纯种 分离→性能测定，如图a、b是采用两种接种方法接种后纯化培养的效果图。下列相关叙述错误的是（　　）
A．可使用液体培养基进行富集培养
B．为获得纯种的目的菌种，需对采集的样品进行灭菌
C．获得图a所示结果的接种过程中，接种环需灼烧灭菌4次
D．利用图b计算出样品中菌体浓度为5．85×108个/mL，则接种稀释液的稀释倍数为106倍
4．某生物兴趣小组完成了“土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”的实验，具体操作流程如图所示。下列叙述错误的是（ ）
A．尿素不耐热，常用过滤除菌法对尿素进行处理
B．振荡20min的目的是使土壤中的微生物均匀分布
C．鉴别尿素分解菌需在培养基中加酚红和缓冲对
D．每克该土样中的尿素分解菌约为1.6×106个
5．农杆菌是植物基因工程中常用到的一种细菌，下表为用来培养农杆菌的LB培养基配方，下图是对培养的农杆菌进行菌落计数的过程。下列叙述错误的是（ ）
蛋白胨 10.0g
酵母浸粉 5.0g
NaCl 10.0g
蒸馏水 1L
配制完成后，将pH调至7.0
A．图中所用接种方法为稀释涂布平板法
B．按表中配方配制的培养基按用途分属于基础培养基
C．上述LB培养基为液体培养基，一般不用于微生物的分离和鉴定
D．接种后的b、c、d培养基应立即与未接种的培养基一起倒置于培养箱中培养
6．下图为利用植物细胞培养生产药用次生代谢物的流程图，下列相关叙述错误的是（ ）
A．外植体经体积分数为70%的酒精消毒30s后需用自来水洗去酒精
B．①过程需在避光条件下，在固体培养基中添加植物激素诱导脱分化
C．②过程可在液体培养基中添加果胶酶等处理愈伤组织获得单个细胞
D．③过程植物细胞通过有丝分裂增殖，无需产生完整植株
7．图示植物原生质体制备、分离和检测的流程。下列叙述错误的是（　　）

A．步骤①可添加相关酶以去除细胞壁
B．原生质体密度介于图中甘露醇和蔗糖溶液密度之间
C．步骤②吸取原生质体放入等渗或略高渗的聚乙二醇溶液中清洗
D．台盼蓝检测后应选择未被染成蓝色的原生质体继续培养
8．CD47是一种细胞膜表面的糖蛋白，可与巨噬细胞结合，从而抑制巨噬细胞的功能。为验证抗CD47的单克隆抗体能减弱CD47对巨噬细胞的抑制作用，某科研小组进行了实验，实验过程如图所示。下列叙述正确的是（　　）
A．向肿瘤细胞共培养体系加入血清，主要用于提供未知的能源物质
B．第一次筛选时可根据细胞中染色体的数目筛选杂交瘤细胞
C．多次筛选时用到抗原—抗体杂交技术和克隆化培养技术
D．预期实验结果为对照组巨噬细胞的吞噬能力高于实验组
9．应用动物细胞培养技术进行人造肉生产逐渐走向商业化，其基本流程如图所示。相关叙述正确的是（ ）
A．过程甲选择幼龄组织的原因是其全能性更易表达
B．过程乙添加的动物血清需先用高压蒸汽进行灭菌
C．过程丙应采用开放式培养以减少培养基pH波动
D．人造肉生产可添加支架材料以便于动物细胞吸附
10．下图是“三亲婴儿”培育技术路线图。据图分析下列叙述错误的是（ ）
A．“三亲婴儿”同时拥有父亲、母亲及卵母细胞捐献者的部分基因
B．该技术路线涉及动物细胞培养、细胞核移植、胚胎移植等操作
C．卵母细胞捐献者携带的红绿色盲基因不能够遗传给“三亲婴儿”
D．核移植的卵母细胞和获能的精子即可直接在培养液中完成受精
11．我国科学家成功地用iPS细胞克隆出了活体小鼠，部分流程如下图所示，其中Kdm4d为组蛋白去甲基化酶，TSA为组蛋白脱乙酰酶抑制剂。下列有关叙述错误的是（　　）
A．体外培养小鼠成纤维细胞和卵母细胞时需要加入动物血清
B．步骤①使小鼠成纤维细胞中原本不能表达的部分基因表达
C．步骤②的实质是去除了卵母细胞中的纺锤体-染色体复合物
D．Kdm4d和TSA促进了重构胚中组蛋白的甲基化和乙酰化
12．下列关于动物细胞工程和植物细胞工程的叙述，正确的是（　　）
A．花药离体培养得到单倍体植株需要用到PEG来诱导细胞融合
B．生产中获得草莓脱毒苗和动物干细胞的培养均使用固体培养基
C．白菜—甘蓝细胞杂交和克隆猕猴的获得均可打破物种间生殖隔离
D．愈伤组织和小鼠iPS细胞的诱导形成均发生了基因的选择性表达
13．下列关于生物技术操作或应用的叙述错误的是（　　）
A．动物细胞培养时常拧松培养瓶瓶盖，以避免杂菌污染并确保细胞所需的气体供应
B．核移植时常通过显微操作法去除卵母细胞的核，此操作需刺穿透明带
C．克隆动物和试管动物培育过程中均需获取卵母细胞和进行胚胎移植
D．胚胎分割技术中的胚胎可以来源于核移植，提高了胚胎的利用率和成活率
14．下列关于动物细胞工程和胚胎工程的叙述，正确的是（ ）
A．体细胞核移植可通过显微操作技术去除卵母细胞中的纺锤体-染色体复合物
B．制备单克隆抗体时，天然抗原通常可直接刺激多种B细胞和辅助性T细胞
C．将目的基因导入鲫鱼受精卵后，经体外培养获得早期胚胎，再进行胚胎移植
D．囊胚进一步扩大导致滋养层破裂，胚胎从其中伸展出来，这一过程叫做孵化
15．精子载体法是以精子作为外源基因载体携带外源基因进入卵细胞，用该方法制备转基因鼠的基本流程如图所示。下列叙述正确的是（ ）
A．①过程中精子获能后细胞膜的流动性增加
B．②过程采用体外受精技术，受精卵中的遗传物质都来自父母双方
C．③过程形成的早期胚胎发育到囊胚或原肠胚才能进行胚胎移植
D．④过程进行胚胎移植前需要对供体和受体进行超数排卵处理
16．胚胎工程技术的应用为优良牲畜的大量繁殖提供了有效的解决办法，如奶牛活体采卵—体外胚胎生产（OPU-IVP）技术，该技术流程如图。已知雄性奶牛Y染色体上有一段雄性特异的高度重复序列，依据该重复序列设计引物，建立了用于奶牛胚胎性别鉴定的PCR体系（SRY-PCR）。下列叙述错误的是（　　）
A．体外受精后，在透明带和卵细胞膜间观察到两个极体说明受精成功
B．活体采卵前诱导母牛超数排卵所注射的激素只能作用于特定细胞
C．取滋养层细胞进行SRY-PCR，应选择结果为阳性的胚胎进行移植
D．受体母牛不会发生免疫排斥反应，所以移植前不需要进行免疫检查
17．如图是小鼠孤雌单倍体胚胎干细胞的获得过程，相关叙述错误的是（　　）
A．卵母细胞通常在受精后才能完成减数分裂，因此不能直接用卵母细胞培养
B．过程①中，精子需要在ATP培养液中获能，卵母细胞应处于MⅡ期
C．过程②中，经历了有丝分裂和分化，不同阶段表达的基因存在差异
D．“早期胚胎”最可能是囊胚，其中的内细胞团细胞具有发育全能性
18．南通某生物兴趣小组的同学用猪肝进行DNA的粗提取与鉴定实验，主要实验流程如下图。相关叙述正确的是（ ）
A．过程①向猪肝组织块中加入研磨液进行充分研磨
B．过程②过滤后弃去滤液，取纱布上的丝状物
C．过程⑤加入酒精后，也可将溶液倒入离心管离心后取上清液
D．过程⑥中A、B试管均会出现蓝色，但B试管中蓝色更深
19．下列有关“DNA的提取与鉴定”“利用PCR扩增DNA片段及电泳鉴定”实验的叙述，错误的是（ ）
A．洋葱切碎加研磨液研磨过滤后，滤液放置4℃冰箱中静置，DNA存在于上清液中
B．将丝状物溶于体积分数95%的酒精，再加入二苯胺试剂在沸水浴中进行DNA鉴定
C．PCR扩增反应体系中dNTP既可以为扩增提供原料，也可以为子链的合成提供能量
D．PCR扩增后，琼脂糖凝胶电泳鉴定结果不止一条条带，可能是引物特异性不强导致
20．逆转录PCR(RT-PCR）是以mRNA为模板逆转录形成DNA，再以此为模板通过PCR进行DNA扩增的技术。如图为利用RT-PCR扩增人乳铁蛋白基因的部分过程，相关叙述错误的是（ ）
A．由于基因的选择性表达，人乳铁蛋白基因mRNA应从人乳腺细胞中提取获得
B．过程①②所需的酶分别是逆转录酶、耐高温的DNA聚合酶，原料均为脱氧核苷酸
C．过程③获得的人乳铁蛋白基因不具有起始密码子、终止密码子的对应序列
D．RT-PCR中，引物P1、P2的长度会影响复性温度以及扩增产物的数量和纯度
二、多选题
21．某兴趣小组试图从土壤中分离分解尿素的细菌，流程如下图所示。下列说法正确的有
A．该实验配制的培养基中不含蛋白胨
B．图中菌液稀释10倍时所加的无菌水的量都为9mL
C．实验的合理顺序是“计算→称量→溶解→灭菌→调pH→倒平板→接种土壤样本→培养→计数”
D．三个培养皿中分别形成了54个、46个、50个菌落，则1g土壤样本中约有分解尿素的细菌个
22．交感神经系统可通过去甲肾上腺素影响骨细胞发育。某科研小组为验证交感神经系统抑制骨细胞发育的机理，进行了图1所示实验，实验检测结果如图2，Cxcl12、Oste、mALP、Runx2、mCOL为骨细胞内表达的不同基因。下列叙述不正确的有（ ）
A．图1实验组模拟了交感神经兴奋对MSCs分化为成骨细胞的影响
B．骨细胞置于含有95%氧气和5%CO2的混合气体的CO2培养箱中进行培养
C．加入无菌处理的胎牛血清，可提高MSCs存活率
D．交感神经兴奋对MSCs发育中各基因表达起抑制作用
23．甘蓝型油菜引入我国历史较短，其遗传基础狭隘。菘蓝（别名“板蓝根”）是传统中药材，具有广谱抗病毒特性。研究人员利用甘蓝型油菜（体细胞中染色体数为38）与菘蓝（体细胞中染色体数为14） 进行体细胞杂交，再通过两次回交，培育抗病毒 甘蓝型油菜的甘蓝型油菜一菘蓝单体附加系，过程如下图。相关叙述正确的是（ ）
A．植物体细胞杂交过程中可用聚乙二醇诱导原生质体融合
B．BC1 植株的染色体组成为PQR，体细胞有丝分裂后期含52条染色体
C．BC2植株群体的体细胞中染色体数最少含有 39条，最多含有45条
D．可从 BC2群体中筛选出7种只含有1 条菘蓝染色体的甘蓝型油菜一菘蓝单体附加系
24．下列关于重组DNA技术的叙述，错误的是（ ）
A．限制酶、DNA连接酶和质粒是重组DNA技术需要使用的基本工具酶
B．限制酶切割DNA分子一次可产生2个游离的磷酸基团，消耗2分子水
C．用做分子运输车的质粒常有特殊的抗生素合成基因，便于重组DNA分子的筛选
D．E.coli DNA连接酶连接平末端的效率远远高于T4 DNA连接酶
25．人胰岛素分子容易聚合导致药效降低，可采用PCR技术改造人胰岛素基因（下图），下列说法正确的是（　　）
A．可通过人工合成获取突变型目的基因
B．上述方法可将待突变序列改造成5 -AAGCCC-3
C．需要在耐高温的DNA聚合酶作用下进行延伸
D．通过电泳检测PCR产物，可确定基因是否改造成功
三、实验题
26．酵母的蛋白质含量可达自身干重的一半，可作为饲料蛋白的来源。有些酵母可以利用工业废甲醇作为碳源进行培养，这样既可减少污染又可降低生产成本。研究人员拟从土壤样品中分离该类酵母，并进行大量培养。下图所示为操作流程，请回答下列问题：
(1)为分离培养该酵母菌，配制培养基时应以 为唯一碳源，按照培养基配方准确称量各组分，将其溶解、定容后，调节培养基的pH，及时对培养基进行分装，并进行 灭菌。
(2)取步骤②中不同梯度的稀释液加入标记好的无菌培养皿中，在步骤③中将温度约 ℃的培养基倒入培养皿混匀，冷凝后倒置培养。经培养，可在培养基的 部位出现菌落。
(3)挑取分离平板中长出的单菌落，按步骤④所示进行划线。下列叙述合理的是 。
a．为保证无菌操作，接种针、接种环使用前都必须灭菌
b．划线时应避免划破培养基表面，以免不能形成正常菌落
c．可以通过逐步提高培养基中甲醇的浓度，获得甲醇高耐受株
d．挑取菌落时，应挑取多个菌落，分别测定酵母细胞中甲醇的含量
(4)步骤⑤中，为使酵母数量迅速增加，培养过程中需保证 的充足供应。为监测酵母的活细胞密度，将发酵液稀释1 000倍后，经等体积台盼蓝染液染色，用25×16型血细胞计数板计数5个中格中的细胞数，理论上 色细胞的个数应不少于 ，才能达到每毫升4×109个活细胞的预期密度。
(5)通过发酵获得的大量的酵母菌菌体，即 ，可作为饲料蛋白的来源。
四、解答题组
27．Ⅰ下图表示科学家通过植物细胞工程，培育“矮牵牛—粉蓝烟草”杂种植株的过程。
(1)步骤①常用含有 酶的 溶液处理离体细胞，既能获得2种植物细胞的原生质体，又能避免原生质体因过度吸水而破裂。
(2)步骤③细胞融合完成的标志是 ，获得的融合细胞至少有 种。若换用矮牵牛的叶肉细胞和粉蓝烟草的 细胞重做该实验，则更易筛选出杂种细胞。
(3)“矮牵牛-粉蓝烟草”杂种植株的体细胞内含 条染色体， 属于 倍体植株。
Ⅱ.银杏的次生代谢产物银杏黄酮、银杏内酯等具有良好的药用效果，一般从叶片中取得，但传统栽植方法周期长、成本高、受环境影响大，无法很好满足市场需求。因而利用组织培养技术，从愈伤组织中提取，具有一定的研究意义与应用前景。
(4)外植体往往选自生长旺盛的部位，但也不能太嫩，因为太嫩的组织细胞在 处理时化学药品渗透较快，后续用 多次冲洗也不易清除，导致细胞失活甚至破裂。
(5)将愈伤组织转入到 培养基中进行扩大培养，以提取次生代谢物。该过程与植物组织培养相比的优点有 。
A．细胞与培养基的结合更加充分 B．受培养基中成分差异的影响较小
C．对环境不敏感 D．对营养物质的吸收更容易
(6)研究表明，用塑料膜或玻璃纸等通气不良的介质封口，可提升银杏黄酮和银杏内酯的产量，原因是 胁迫细胞诱导产生更多的次生代谢物。
五、解答题
28．土壤盐渍化影响水稻生长发育。科研人员将水稻耐盐基因OsMYB56导入不耐盐碱水稻品种吉更88中，培育出了4株耐盐碱水稻新品种。其操作流程及相关限制酶识别序列和切割位点如下图，图中Ⅰ~Ⅲ为限制酶的酶切位点，bar为抗除草剂基因，Kanr为卡那霉素抗性基因。请回答：
(1)过程①需要模板DNA、 （同时提供原料和能量）、 酶、2种引物、Mg2+等。被转化的根瘤农杆菌会将Ti质粒的 转移到水稻的 上。
(2)过程①所用引物如下，则过程②使用的限制酶是 和 ，限制酶识别序列应该添加在引物的 端。
(3)花椰菜病毒启动子含有 的核苷酸序列，本研究中设计两个相同启动子分别连接bar和目的基因，其目的是 。
(4)科研人员采用特定的方法大量提取成功转化的4株植株叶片的基因组DNA（目的基因中不含AAGCTT），用Hind Ⅲ完全消化，消化产物经电泳、转膜后与目的基因的探针杂交，其杂交结果如图所示（图中数字标号代表转化成功的植株）。下列有关分析正确的有 。
①还有不含目的基因的DNA条带在图中没有显示
②杂交带位置不同说明Hind Ⅲ消化形成的DNA片段长度不同
③相同位置上杂交带对应DNA片段的脱氧核苷酸序列相同
④目的基因插入受体细胞核DNA的位置和数量都是随机的
29．目前最常利用杂交瘤杂交法来制备特异性抗体。长春花是野生花卉，其所含长春碱具有良好的抗肿瘤作用。图1是某双特异性抗体作用图，下图2是科研人员通过杂交一杂交瘤细胞技术(免疫的B淋巴细胞和杂交瘤细胞杂交技术)生产能同时识别癌胚抗原和长春碱的双特异性单克隆抗体部分过程。请回答下列问题:

(1)与植物体细胞杂交相比，图2中过程②特有的诱导融合方法是 ，过程②选用的骨髓瘤细胞 (选填“能”或“不能”)在HAT培养基上生长。
(2)图2中①步骤注射癌胚抗原的目的是 。图2方框内需要经过 次筛选，才能获取单克隆杂交—杂交瘤细胞。体外培养到一定时期的单克隆杂交—杂交瘤细胞会因为细胞密度过大、 等因素而分裂受阻，需进行传代培养。
(3)图2中③选出的杂交瘤细胞，还需进行 和 ，才能筛选出足够量的 的杂交瘤细胞。与传统血清抗体相比，单克隆抗体最主要的优点是 。
(4)与直接使用长春碱相比，将长春碱与双特异性单克隆抗体结合后给药，对人体的副作用更小，原因是 。
题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
答案 C D B C D A C C D D
题号 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20
答案 D D D A A C B A B C
题号 21 22 23 24 25
答案 ABD BD AD ACD ABC
26．(1) 甲醇 高压蒸汽（湿热）
(2) 50 表层和内部
(3)a、b、c
(4) 营养和氧气 无 40
(5)单细胞蛋白
27．(1) 纤维素酶和果胶酶 等渗或略高渗
(2) 融合细胞再生出细胞壁 3/三 根尖等非绿色组织
(3) 38 四
(4) 消毒 无菌水
(5) 液体 AD
(6)低氧
28．(1) dNTP 耐高温的DNA聚合酶/TaqDNA聚合酶 T-DNA 染色体DNA
(2) BamH I Sac I 5’
(3) RNA聚合酶识别、结合 依据bar表达推测目的基因同时表达
(4)①②④
29．(1) 灭活的病毒 不能
(2) 刺激小鼠产生相应的B淋巴细胞 2 有害代谢物的积累/培养液中营养物质缺乏
(3) 克隆化培养 (专一)抗体检测 既能无限增殖又能产生特异性抗体 特异性强、灵敏度高、可大量制备
(4)双特异性单克隆抗体能将抗药物定向带到癌细胞所在位置，在原位杀死癌细胞

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