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选择性必修三第1章
第2节　微生物的培养技术及应用（一）
一、单选题
1．下列关于微生物培养的叙述，正确的是(　　)
A．微生物在培养液中培养一段时间后用显微镜观察，可见到形成的菌落
B．NH3可以作为硝化细菌的氮源
C．固体培养基中加入的琼脂能提供额外的碳源和氮源
D．某些细菌生长过程中需要额外补充营养物质，比如培养酵母菌时，要添加维生素
2．某异养自生固氮菌能将大气中的氮还原成氨，若在实验室中分离土壤中的该菌，则配制培养基时，一般不需要加入的物质是(　　)
A．蒸馏水 B．葡萄糖
C．氯化钠 D．蛋白胨
3．下列关于微生物培养基的叙述，正确的是(　　)
A．培养基是为微生物的生长繁殖提供营养的基质
B．培养基中的营养物质浓度越高，对微生物的生长越有利
C．固体培养基中加入少量水即可制成液体培养基
D．在培养细菌时，一般需要将培养基调至酸性
4．许多生物学实验十分重视无菌操作，防止杂菌污染。下列操作正确的是(　　)
A．对无菌室、超净工作台和实验员可采用紫外线杀菌
B．家庭制作酸奶时，要将容器和鲜牛奶进行灭菌
C．加入培养基中的指示剂和染料不需要灭菌
D．灼烧灭菌法可杀死微生物的营养体和芽孢
5．微生物的实验室培养要进行严格的灭菌和消毒。下列关于灭菌和消毒的叙述，正确的是(　　)
A．煮沸消毒法中100 ℃煮沸5～6 min可以杀死全部微生物的细胞和芽孢、孢子
B．培养皿用酒精直接擦拭即可达到彻底灭菌的目的
C．灼烧灭菌的对象是金属器具，不可以是玻璃器具
D．消毒和灭菌的原理是相同的
6．下列关于实验室培养和纯化酵母菌过程中的部分操作的说法，正确的是(　　)
A．培养酵母菌的试剂和器具都要进行湿热灭菌
B．称量、溶化和倒平板都需要在酒精灯火焰旁进行
C．倒好的平板要立即使用，以免表面干燥，影响酵母菌生长
D．将平板倒置放入适宜温度的恒温培养箱中培养
7．采用平板划线法能将单个微生物分散在固体培养基上，下列有关平板划线操作的叙述，错误的是(　)
A．第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物
B．每次划线前，灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种
C．在第二区域内划线时，接种环上的菌种直接来源于菌液
D．划线结束后，灼烧接种环，能及时杀死接种环上的菌种，避免微生物污染环境和感染操作者
8.如图是平板划线示意图，划线的顺序为1→2→3→4→5。下列操作方法正确的是(　　)
A．操作前不用进行任何处理
B．划线操作必须在酒精灯火焰上进行
C．在5区域中才可以得到所需菌落
D．在1、2、3、4、5次划线的前后都要对接种环灭菌
9．如表中 Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ 是用来培养微生物的三种培养基。甲、乙、丙都能在Ⅲ中正常生长繁殖；甲能在 Ⅰ 中正常生长繁殖，而乙和丙都不能；乙能在 Ⅱ 中正常生长繁殖，甲、丙都不能。下列说法正确的是(　)
序号 粉状硫10 g K2HPO4 4 g FeSO4 0.5 g 蔗糖10 g (NH4)2SO4 0.4 g H2O 100 mL MgSO4 9.25 g CaCl20.5 g
Ⅰ ＋ ＋ ＋ ＋ － ＋ ＋ ＋
Ⅱ ＋ ＋ ＋ － ＋ ＋ ＋ ＋
Ⅲ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋
注：“＋”表示含有该物质，“－”表示不含有该物质。
A．甲、乙、丙都是异养型微生物
B．甲、乙都是自养型微生物、丙是异养型微生物
C．甲是固氮微生物、乙是自养型微生物、丙是异养型微生物
D．甲是异养型微生物、乙是固氮微生物、丙是自养型微生物
10．下列有关微生物的分离与培养的叙述，错误的是(　　)
A．获得纯净培养物的关键是防止杂菌污染
B．倒置平板可防止培养皿皿盖上的冷凝水落入培养基
C．倒平板时将培养皿的皿盖拿开，以便于将锥形瓶中的培养基倒入培养皿
D．检验培养基是否被杂菌污染的有效方法是将未接种的培养基放在恒温培养箱中培养
二、多选题
11.生长图形法是一种测定微生物营养需求的简便方法。为探究某嗜热菌所需生长因子的种类，某研究小组把该菌的悬浮液与不含任何特殊营养物质但含有其他必需营养物质的培养基混合后倒平板，然后在平板上划分数区，将甲、乙、丙三种生长因子分别添加到不同区域，培养结果如图所示。下列说法正确的是( )
A．倒平板后直接培养可判断有无污染
B．将所有平板放置在适宜的37 ℃下倒置培养并观察
C．图示结果表明该菌需要特殊营养物质乙和丙
D．生长图形法还可用于某些菌种的筛选
12．下列关于消毒与灭菌的叙述，正确的是(　　)
A．玻璃器皿、金属用具等可以采用干热灭菌法灭菌
B．消毒是灭菌的俗称，它们的本质是一样的
C．灭菌就是杀死物体内外所有的病原微生物
D．接种环、培养皿可以直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧
三、非选择题
13．请根据所学微生物培养的知识，回答下列问题：
(1)在液体培养基中加入 后制成的固体培养基，是实验室最常用的培养基。
(2)实验室中常用 法对培养基进行灭菌。不同培养基的具体配方不同，但一般都含有水、 、 和无机盐。
(3)培养微生物时，将培养皿倒置的目的是
。
实验结束后，应对使用过的培养基进行 处理。
14．GA3（C19H22O6）是一种与赤霉素作用类似的植物生长调节剂，能促进茎伸长和种子萌发。GA3的广泛施用会导致其在土壤中残留，研究小组从长期施用GA3农田的土壤中筛选出了能降解GA3的菌株。回答下列问题：
(1)大多数细菌不能分解GA3，少数细菌能分解GA3，原因是后者能产生 。培养瓶甲能富集培养GA3降解菌，瓶中的培养液必备的营养成分是 。
(2)倒平板时，为避免周围空气中微生物的干扰，应该在 附近倒平板。过程③采用的接种方法是 。选择培养基乙中应以 为唯一的碳源。
(3)对培养的GA3降解菌进行计数时，通常选用一定稀释范围的样品液进行培养，其目的是
。
15．北京冬奥会食堂让各国运动健儿爱上中国味道，其餐余垃圾在垃圾集中点采用“生化+雾化+膜过滤”技术处理后，可以达到无二次污染的标准。为筛选对抗生素有抗性、能高效降解淀粉的微生物，提高生化处理效率，研究人员将餐余垃圾机械化处理后加入装有无菌水的锥形瓶中制备餐余垃圾浸出液，然后进行如图所示的操作。回答下列问题。
(1)X培养基的化学成分方面具有的特点是 ，培养一段时间后滴加碘液，有的菌落周围出现透明圈的原因是 。
(2)向X培养基上接种细菌的方法是 ，该接种方法也可以用于对细菌进行计数，但需要将浸出液做足够的稀释，原因是 。
(3)Y培养基与X培养基的主要区别是 ，在该培养基中微生物增殖速度更快，原因是
。
一、单选题
1．【答案】B 【解析】　微生物在固体培养基表面或内部生长，可以形成肉眼可见的菌落，A错误；硝化细菌可利用氧化NH3释放的能量合成有机物，B正确；固体培养基中加入的琼脂不能被微生物分解利用，故琼脂不能提供额外的碳源和氮源，C错误；酵母菌不属于细菌，D错误。
2．【答案】D 【解析】　培养该菌时，需要加入蒸馏水；该微生物为异养生物，需要葡萄糖作为碳源；培养该微生物需要无机盐，故需要加入氯化钠；该微生物可以自己固氮，不需要加入氮源，故不需要加入蛋白胨，D符合题意。
3．【答案】A 【解析】　固体培养基中含有凝固剂琼脂，加入水不会制成液体培养基，C错误；在培养细菌时，一般需要将培养基调至中性或弱碱性，D错误。
4．【答案】D 【解析】　对无菌室、超净工作台可采用紫外线杀菌，对实验员可用酒精擦拭双手进行消毒，A错误；家庭制作酸奶时，要将容器进行灭菌，鲜牛奶不进行灭菌，以免杀死乳酸菌，B错误；加入培养基中的指示剂和染料也需要灭菌，否则可能会污染培养基，C错误；灼烧灭菌法可杀死物体内外所有的微生物(包括微生物的营养体、芽孢和孢子)，D正确。
5．【答案】D 【解析】　灭菌可以杀死环境中的一切微生物，包括芽孢和孢子，消毒只能杀死物体表面或内部一部分微生物，A错误；玻璃器皿等耐高温、需要保持干燥的实验器具，应采用干热灭菌法进行灭菌，而用酒精直接擦拭达不到彻底灭菌的目的，B错误；灼烧灭菌的对象可以是金属器具，也可以是玻璃器具，C错误；消毒和灭菌的原理是相同的，都是使微生物的蛋白质变性，D正确。
6．【答案】D 【解析】　接种环等常用灼烧灭菌法处理，吸管、培养皿等常用干热灭菌法处理，培养基及多种器材用湿热灭菌法处理，A错误；倒平板、接种需要在酒精灯火焰旁进行，而称量、溶化不需要在酒精灯火焰旁进行，B错误；倒好的平板需要冷却后使用，C错误。
7．【答案】C 【解析】　从第二次划线开始，每次划线时接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，C错误。
8.【答案】D 【解析】　划线之前应对接种环灼烧灭菌；划线操作在酒精灯火焰旁进行；在5个区域中，只要有单个活菌，通过培养均可获得所需菌落。
9．【答案】C 【解析】　根据表格分析，甲能在Ⅰ中正常生长繁殖，而乙和丙都不能，而Ⅰ培养基缺氮，说明甲属于固氮微生物；乙能在Ⅱ中正常生长繁殖，而甲和丙都不能，Ⅱ培养基中没有有机碳源，说明乙属于自养微生物；而丙不能在Ⅰ培养基中生长，说明不能固氮，又不能在Ⅱ培养基中生长，说明不能合成有机物，只能在Ⅲ培养基中生长，说明丙属于异养微生物，C正确。
【答案】C 【解析】　获得纯净培养物的关键是防止杂菌污染，A正确；倒置平板可防止培养皿皿盖上的冷凝水落入培养基，B正确；倒平板时将培养皿的皿盖拿开，容易造成杂菌污染，C错误；检验培养基是否被杂菌污染的有效方法是将未接种的培养基放在恒温培养箱中培养，D正确。
二、多选题
11.【答案】ACD 【解析】　倒平板后不接种任何菌种直接进行培养观察有无菌落的出现，可以判断培养基有无污染，A正确；该菌为嗜热菌，应放置在其适宜的高温条件下培养，而不是37 ℃，B错误；图中嗜热菌在添加了乙、丙特殊营养物质的区域生长，故该菌需要的特殊营养物质是乙和丙，C正确；不同的菌种所需的特殊营养物质不同，利用生长图形法可用于某些菌种的筛选，菌种只会在提供其需要的生长因子的区域生长，D正确。
12．【答案】AC 【解析】　消毒和灭菌的结果不完全相同，消毒只能杀死物体体表或内部的一部分微生物，而灭菌能杀死物体内外所有的微生物，包括孢子和芽孢，B错误；接种环可以直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧灭菌，而培养皿不行，培养皿常采用干热灭菌法灭菌，D错误。
三、非选择题
13．【答案】(1)琼脂(凝固剂)　
(2)湿热灭菌　碳源　氮源　
(3)防止皿盖上的水珠落入培养基　灭菌
14．【答案】(1)分解GA3的酶 水、碳源、氮源和无机盐
(2)酒精灯火焰 稀释涂布平板法 GA3
(3)确保获得菌落数在30~300之间、适于计数的平板
15.【答案】(1)含抗生素且以淀粉为唯一的碳源 能分解淀粉的细菌将菌落周围的淀粉分解，加入碘液后不再显示蓝色
(2)稀释涂布平板法 如果稀释倍数不够高，则一个菌落可能是由多个细菌共同繁殖而成，统计的数据就会低于实际数值
(3)Y培养基是液体培养基，而X培养基是固体培养基 微生物在液体培养基中与营养物质接触更充分，物质交换效率高

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