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浙科版 高二年级 第二学期 第2课
分离土壤中水解纤维素的菌株
提出问题：法海寺森林公园枯枝残叶过多，在气候干燥条件下容易诱发火灾
解决思路：利用微生物的降解作用
从土壤中分离出能水解纤维素的菌株，并检测其水解纤维素的能力
制定实验流程：
采集土样
制备土壤浸出液
分离纯化菌种
目的菌株的筛选与鉴定
目的菌株的保藏与扩大培养
稀释涂布平板法
刚果红纤维素平板初步鉴定
制备菌悬液
分离
鉴别与筛选
保存
采集土样
采集土样
制备土壤浸出液
稀释涂布平板分离菌株
土壤中水解纤维素的菌株的分离与计数
第二课时
菌落观察与计数
小组汇报
1.09*106
5.2*105
4.6*105
3.8*105
校园大树
山上石头旁
山上石头旁
山上大树根际
实验结果讨论与分析
{5C22544A-7EE6-4342-B048-85BDC9FD1C3A}组别
取样地点
每克土壤目的菌株数目
分解纤维素能力
1组
山上大树根际
5.1*105
2.5
2组
校园大树
2.6*105
1.5
3组
山上石头旁
2.3*105
2.5
4组
山上石头旁
1.9*105
2.5
最适取样地点：根际微生物、秸秆分解堆、原生林土壤、某些动物粪便
最适涂布浓度：
酶活力初步测定：
滤纸崩解实验
A蒸馏水对照组B菌悬液实验组
结合形态学鉴定以及DNA测序分子学鉴定结果
芽孢杆菌属细菌
脉纹抱菌属真菌
触类旁通
塑料给人们的生活带来了便利，但由于它的物理化学性质很稳定，自然降解时间需要500年以上！在过去的50年里，全球塑料产量增加了20倍，在环境中留下了70亿吨的垃圾。
分别用等量的麦麸（把小麦种子加工成面粉过程中余下的外皮，是黄粉虫喜爱的食物）和泡沫塑料喂食黄粉虫，30天后实验结果如图1和图2所示：
问题1：如何证明“聚苯乙烯是被黄粉虫吸收利用的”？
问题2：如何从黄粉虫肠道内分离出靠聚苯乙烯生存的细菌？
富集
分离
鉴别
保存
制备菌悬液
实验流程
石油降解菌
农药降解菌
抗生素敏感菌
……
小汇报
关于对土壤中可水解纤维素的微生物的研究
一、土壤样本
作为本次实验的研究对象，我们在研究过程中首先要对土壤进行处理。本次实验我们是从校后山上腐殖质比较丰富的地方取得的大约半信封的松软的土进行实验。
二、各浓度梯度菌液培养后得到的菌落
十倍稀释过菌液
经培养得到的菌落
二、各浓度梯度菌液培养后得到的菌落
{F5AB1C69-6EDB-4FF4-983F-18BD219EF322}稀释倍数
第一组
第二组
第三组
平均
100
115
84
74
91
这里的数据单位是每0.05ml有多少微生物，下同
二、各浓度梯度菌液培养后得到的菌落
{F5AB1C69-6EDB-4FF4-983F-18BD219EF322}稀释倍数
第一组
第二组
第三组
平均
1000
11
7
14
11
三、对实验数据的分析
经过了三组实验我们发现：在估测土壤中微生物数量上，由于原液和十倍稀释的菌液得到的单菌落数量过多，难以测量，不便于计算。而稀释1000倍的菌液得到的单菌落数量过少，计算误差较大。故采用第二组实验的数据估算土壤中所含微生物的数量。计算数据来源和计算步骤如下：
（115+84+74）÷3÷0.05×100×6=1092000（个）
{F5AB1C69-6EDB-4FF4-983F-18BD219EF322}稀释倍数
第一组
第二组
第三组
平均
100
115
84
74
91
每克样品中的菌株数=
某一稀释度下平板上生长的平均菌落数
涂布平板时所用的稀释液的体积（ml）
×
稀释倍数
三、对实验数据的分析
估测完了微生物的数量还要在研究一下这些微生物水解纤维素的能力，这时就不用考虑数量上是否有较大误差的限制，要挑选有清楚的透明环的单菌落
微生物水解纤维素能力的计算方法：
透明圈的直径除以菌落的直径
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